原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
大鼠鼻腔粘膜上皮细胞
组织来源
鼻腔粘膜组织
货号
P-X1747
产品规格
5×105
生长特性
贴壁
产品类别
大鼠原代细胞
细胞形态
不规则细胞
细胞详述：
鼻腔粘膜是覆盖在动物体内呼吸器官管腔内壁的一层组织结构，由上皮组织和疏松结缔组织构成。鼻腔粘膜覆盖于鼻腔表面，粘膜下方为软骨、骨或骨骼肌。
上皮的垂直切面上，细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状，为具有增殖分化能力的干细胞，部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞，再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状，基底层细胞能不断分裂，以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的，有利于复层扁平上皮的营养。
细胞特性：
1） 组织来源于实验动物的正常鼻腔粘膜组织。
2) 细胞鉴定：广谱角蛋白（PCK）或细胞角蛋白-19（CK-19）荧光染色为阳性。经鉴定细胞纯度高于90%。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
4) 细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。
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注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。