组织来源
手术切除的肺腺癌组织
货号
P-X1265
产品规格
5×105
生长特性
贴壁
产品类别
人原代细胞
细胞形态
成纤维样细胞
细胞详述:
产品规格: >5×10 5 细胞数
包装规格: 1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶
成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分。在肺组织中生理条件下,成纤维细胞的主要功能包括 : 构造和维持肺脏的正常形态,合成和释放细胞外基质,为肺组织和细胞的高效交换气体提供物质基础,构成肺组织的主要支架,维持肺上皮和内皮细胞正常生理作用,以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
病理条件下,成纤维细胞病理性增殖转型及细胞外基质进行性异常积聚并取代正常的肺组织结构,从而造成肺部的纤维化。
1) 细胞来源于手术切除的肺腺癌组织。
2) 细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
我们推荐使用 Delf原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
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原代细胞实验步骤:
以胚胎小鼠为例 1.取材:将孕鼠拉颈椎处死,投入75%酒精浸泡数秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织,打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2.用Hanks液洗涤3次,剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3.用弯头剪把胚胎尽量剪碎,每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行,即消化法和组织块培养法。 4.若使用消化法,则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液,800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清,加入带有双抗的培养基,放入培养瓶中培养。 注:细胞分离的方法各实验室不同,所采用的消化酶也不相同(如胶原酶,透明质酶等)。 5.若进行组织块培养,则不做步骤4,加入几滴血清于组织块中,再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开,注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2-3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来,从边角加入4~5mL培养基,使细胞接触到培养基,放培养箱内继续进行培养。
注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
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