原理:利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体。间接法常用于检测抗体,ELISA间接法通用操作过程为:
1. 将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。
2. 加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
3. 洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。
4. 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。