酶联免yi 吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。ELISA检测的三种方法双抗体夹心法、间接法、竞争法优缺点:
优点:
双抗夹心法:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化,孵育2次,操作简单,减少人为因素的影响,可靠的特异性。
间接法:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的1级抗体则能保留它多的免yi 反应性。
竞争法:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。
缺点:
双抗夹心法:缺少链霉亲和素的抗体,起不到型号放大作用,而且抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。
间接法:要经过三次孵育,操作步骤繁琐,稍微不注意会导致操作误差,交互反应发生的机率较高。
竞争法:竞争法对于手法要求非常高,整体的敏感性和专一性都较差。