大鼠胸腺细胞处理方法及使用说明

    一．大鼠胸腺细胞贴壁细胞客户接收到细胞，用75%的酒精**（建议配制75%酒精的水是**过的）培养瓶外部。肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。显微镜观察细胞，当细胞融汇80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。严格无菌操作，打开细胞培养瓶。将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。用PBS2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰.酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2培养。

    二．大鼠胸腺细胞悬浮细胞

    1.接收到细胞，用75%的酒精**（建议配制75%酒精的水是**过的）培养瓶外部。

    2.肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

    3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

    4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。

    5.1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2培养