1、逆转录 PCR 时，提取 RNA 是关键，需分离高质量 RNA（纯度和完整性）。
2、 整个操作过程需使用去 RNA 酶的枪头、EP 管等耗材。
3、逆转录过程中要谨防 RNA 酶的污染，加入 RNA 酶抑制剂。
4、为了防止非特异性扩增，必须设阴性对照。
5、 逆转录实验应全程在冰上操作完成，操作过程应避免 RNase 污染。
6、 提高逆转录预热温度（也可根据相应逆转录试剂盒进行调整）。
7、 减少基因组 DNA 污染，可使用去基因组的逆转录试剂盒。