ELISA实验前准备好所需的实验试剂，主要包括96孔高吸附酶标板，抗原，包被液，封闭液，待测抗体，酶标二抗，抗体稀释液，洗涤液，显色液TMB，终止液。
1. 首先确认抗原名称／浓度，用包被液稀释抗原，将稀释好的抗原加入96孔板，加在酶标板底部，不得粘在孔壁上。然后盖上封板膜，于4℃过夜或37℃2小时。
2. 倒去未吸附的抗原稀释液，加入2%BSA进行封闭，4℃过夜或37℃2h。
3. 按实验设计要求对待测抗体进行稀释，加入包被有抗原且封闭好的酶标板，37度孵育1～2小时。注意使用排枪时不可戳到酶标板底部，每次排枪吸液体时液面相平。
4. 洗板后，加入酶标二抗，37度孵育1～2小时。
5. 洗板，若孵育时间较长可增加洗板次数。
6. 加入TMB于37度进行显色5～20分钟，观察颜色变化。
7. 加入草酸终止显色，将96孔板置于酶标仪读取波长为450nm的吸光值。
所以封闭液是2%BSA（2gBSA加100ml的水）