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抗体的保存分析
抗体浓度过低(<1毫克/毫升)更容易发生抗体的失活以及增加物理吸附造成的损失。因此,我们都要尽量的保持抗体(例如,1-5毫克/毫升)在储存期间的浓度。通常的做法是添加“载体”蛋白质,如纯化牛血清白蛋白(BSA)以防止这种降解和损失。
1、多克隆抗体
多克隆抗体在血清中于-20℃保存十年其活性损失不大。然而,一旦抗体被纯化后,储存在50%的甘油中于-20℃保存,即使没有冻融,其活性的损失也可以观察到,尽管其进程仍然非常缓慢。即使没有甘油,只要你不反复冻融,抗体也可以存储在-20℃几年甚至几十年。另一个重要的事情是,该抗体浓度应高于1毫克/毫升,因为稀的抗体容易失去活性而且容易造成物理吸附导致的损失。
2、单克隆抗体
单克隆抗体可以保存在50%的甘油存放于-20℃。也可以将其保存在饱和硫酸铵于4℃或-20℃保存。多年未见有失活、xi 菌滋生以及氧化。而冻干法(冷冻干燥,干燥或从冰冻状态)为一些冰冻以后不稳定抗体提供了一种替代的保存方法。在大多数情况下,冻干的抗体zui好是存放在-20℃。虽然冷冻干燥有许多优点,它需要昂贵的设备和劳动力。
3、带标记的抗体一般储存在黑色容器中或者用锡箔纸盖住。
4、酶标记抗体
碱性磷酸酶和其他酶结合物对于冷冻特别敏感,一般应在4C短期存储。
标记抗体长期保存zui好是在终浓度为50%的甘油或乙二醇中于-20C保存。虽然某些酶结合物可在无保护剂的情况下于-20C储存,但必须分装,以防止反复冻融。
5、荧光标记抗体
荧光遇光容易分解,荧光标记的试剂(不只是抗体)必须避光保存,其应该存放在4C、避免让其凝固。
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