原理：低温条件下保藏可减缓微生物菌种的代谢活动，抑制其繁殖速度，达到减少菌株突变，延长菌种保藏时间的目的。技术要求：
1、不同菌种应根据要求选择合适的培养基。
2、接种时要求无菌操作，避免染菌。
3、保藏期间要定期检查菌种存放的房间、冷库、冰箱等的温度、湿度，各试管的棉塞有无污染现象，如发现异常应取出该管，重新移植培养后补上空缺。
4、大量菌种同时移植时，各菌株的菌号、所用培养基要进行核对，避免发生错误。
5、每次移植培养后，应与原保藏菌株和菌株的登记卡片逐个对照，检查无误后再存放。
6、斜面菌种应保藏相继三代培养物以便对照，防止因意外和污染造成损失。