碱性蛋白胨水颗粒使用方法:
1、取瓶内弧菌显色培养基干粉71.3克,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,可按比例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至*溶解,不需高压灭 菌,冷至约50℃,倾注灭 菌平皿。
2、以无菌操作取检样25 g(mL),加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225 mL,用旋转刀片式均质器以8 000 r/min均质1 min,或拍击式均质器拍击2 min,或用Pulsifier脉冲式样品处理器均质30秒,制备成1:10的均匀稀释液。如无均质器,则将样品放入无菌乳钵中磨碎,然后放在500 mL的灭 菌容器内,加225 mL3%氯化钠碱性蛋白胨水,并充分振荡。
3、增菌:将上述1:10稀释液于36 ±1 ℃培养8~18h。
4、分离:在增菌液中用接种环取一环,于弧菌显色平板上划线分离,于36 ±1 ℃培养18~24 h。5、通过验证试验进一步确认假定性副溶血性弧菌和其他弧菌,如氧化酶、革兰氏染色、生化鉴定等。进一步的试验。
注意事项:
1. 称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
2. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。
3. 自制平板时需注意培养基的厚度,厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降,开裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基,平板培养基厚度至少为2mm。
4. 即用型成品平板应该尽量保持在2-8℃下保存且与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥