ELISA复孔做的不好，CV值差异大可能原因分析：
1、复孔OD450数值在0.5-2.5之间计算的偏差相对较小，小于0.5会由于操作误差导致计算的CV值偏高，复孔样品数量在5-10个合适。
2、操作时按照标准动作进行加样，比如要求枪头不能碰触到孔壁内侧和底面，枪头尖部的残留液体可以触碰到液面，使之流入样品孔。
3、加样尽量快速准确，不要产生气泡。
4、样品需要做预实验，使用不同浓度进行测试，找到佳的稀释比。错误的稀释比会导致复孔误差大