ELISA实验间接法是目前常用的方法。首先用已知未标记的抗体（第1抗体）与待检抗原反应或用未知抗体与已知抗原反应，反应一定时间后，洗去未结合的抗体，再与标记的抗免 疫球蛋白抗体（二抗）反应。在第1步反应中，若抗原抗体发生了反应，则抗体被固定在标本上，那么第2步反应中标记的抗体（二抗）必然与第1步反应形成的抗原抗体复合物中的抗体发生反应，这样就可以通过二抗的示踪，对标本中未知抗原或抗体进行鉴定。
其优点为：
①敏感性较高，是直接法的5-10倍；
②用一种标记的抗体，就能与一种以上的相应的抗体或抗原配合鉴定多种未知的抗原或抗体；
③既能鉴定未知抗原，又能鉴定未知抗体。
其缺点有：
①在反应中有多种因子参与，容易产生非特异性染色，结果判断有时较困难；
②操作步骤多，费时。