公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
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LGMN小鼠天冬酰胺內肽酶ELISA检测试剂盒
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英文名称
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Mouse Legumain(LGMN)ELISA Kit
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货号
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PM104965
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包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L
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5 号标准品
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150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
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1200ng/L
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4 号标准品
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150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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600ng/L
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3 号标准品
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150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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300ng/L
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2 号标准品
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150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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150ng/L
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1 号标准品
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150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
人肌钙蛋白I(Tn-I)酶联吸附测定试剂盒紧密毛霉Rat D2D (D-Dimer) ELISA Kit
人相关浆蛋白A(PAPPA)酶联吸附测定试剂盒固氮螺属Rat DC-SIGN/CD209 (DC Specific Intercellular Adhesion Molecule 3-Grabbing Nonintegrin) ELISA Kit
人碱性磷酸酶(ALP)酶联吸附测定试剂盒 谷氨酸棒状杆Rat DAP6 (Death Associated Protein 6) ELISA Kit
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联吸附测定试剂盒 鞘氨盒属Rat DAF (Decay Accelerating Factor) ELISA Kit
人白介素1β(IL-1β)酶联吸附测定试剂盒坚硬芽孢杆Rat DCN (Decorin) ELISA Kit
人白介素12(IL-12)酶联吸附测定试剂盒苏云金芽孢杆库尔斯塔克亚种Rat D-5 (Defensin-5) ELISA Kit
人白介素12 p40(IL-12 p40)酶联吸附测定试剂盒葡萄座腔Rat CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit
人铁蛋白(FE)酶联吸附测定试剂盒枯草芽孢杆Rat DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit
人球蛋白G(IgG)酶联吸附测定试剂盒粉红单端孢霉Rat DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit
人血清转铁蛋白(TF)酶联吸附测定试剂盒柠檬黄色农球Rat DHEA (Dehydroepiandrosterone) ELISA Kit
人绒毛膜促性腺(CG)酶联吸附测定试剂盒油菜核病Rat DPD (Deoxypyridinoline) ELISA Kit
人生长(GH)酶联吸附测定试剂盒溶杆Rat DNASE1 (Deoxyribonuclease I) ELISA Kit
人白介素9(IL-9)酶联吸附测定试剂盒Erwinia amylovoraRat ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit
人III型前胶原(PCIII)酶联吸附测定试剂盒运动节杆Rat Des (Desmin) ELISA Kit
人III型前胶原氨基端原肽(PIIINP)酶联吸附测定试剂盒金龟子绿僵Rat DAO (Diamine Oxidase) ELISA Kit
LGMN小鼠天冬酰胺內肽酶ELISA检测试剂盒神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体Human NCOA1(Nuclear receptor coactivator 1) ELISA Kit地衣形芽孢杆探针法荧光定量PCR试剂盒
MYRIP蛋白抗体Human SLC30A8(Zinc transporter 8) ELISA Kit疱疹病探针法荧光定量PCR试剂盒
髓磷酯髓鞘蛋白1抗体Human GRIN1(Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1) ELISA Kit内氏放线探针法荧光定量PCR试剂盒
巨噬克隆激因子抗体Human SLC25A12(Calcium-binding mitochondrial carrier protein Aralar1) ELISA Kit节杆通用探针法荧光定量PCR试剂盒
膜相关环指蛋白4抗体Human UBAP2(Ubiquitin-associated protein 2) ELISA Kit溶血隐秘杆探针法荧光定量PCR试剂盒
肌球蛋白轻链激酶抗体Human FSCN2(Fascin-2) ELISA Kit双芽巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒
单纺锤体蛋白激酶1抗体Human REG3γ(RegeneRating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit牛巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒
有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白2抗体Human CDC42(Cell division control protein 42 homolog) ELISA Kit禽腺病探针法荧光定量PCR试剂盒
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。