LAT小鼠T-细胞激活连接蛋白ELISA方法

公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
坚强芽孢杆Human VE-Cadherin (Vascular Endothelial Cadherin) ELISA Kit

盐水球形Human VEGF165 (Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit

黄曲霉Human IgE (Immunoglobulin E) ELISA Kit

羊无浆体（湟源株)Human sVCAM-1/CD106  (soluble Vascuolar Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit

(可订)大肠埃希氏OP50Human ALB (Albumin) ELISA Kit

寒研所芽孢杆Human PAF (Platelet Activating Factor) ELISA Kit

哈茨木霉Human PI (Proinsulin) ELISA Kit

大斑凸脐蠕孢Human GC (Glucagon) ELISA Kit

美澳型核果褐腐病Human F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit

诺尔氏属Human fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit

酿酒酵母Human fT3 (Free Triiodothyronine) ELISA Kit

枯草芽胞杆Human f-Hb (Free Haemoglobin) ELISA Kit

枝芽胞Human Pg (Progesterone) ELISA Kit

香菇18Human TNF-β (Tumor Necrosis Factor Beta) ELISA Kit

嗜盐芽孢杆Human EP (Erythrocyte Protoporphyrin) ELISA Kit
LAT小鼠T-细胞激活连接蛋白ELISA方法蛋白激酶R样内质网激酶抗原Anti-DNAJB1 Antibody猴血小板衍生生长因子受体样蛋白（PDGFRL）elisa定量检测试剂盒

纤维束蛋白同源物1/肌动蛋白集束蛋白/圆线虫紫癜 抗原Anti-DNAJB11 Antibody猴中性粒弹性蛋白酶（NE/ELA2）elisa定量检测试剂盒

胃蛋白酶原C蛋白抗原Anti-DNAJB11 Antibody猴多巴脱羧酶（DDC）elisa定量检测试剂盒

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗原Anti-DNAJC17 Antibody兔骨涎蛋白（BSP）elisa定量检测试剂盒

颗粒蛋白前体抗原Anti-DNAJB4 Antibody猴β干扰素（IFN-β）elisa定量检测试剂盒

抑制素/肿瘤抑制因子抗原Anti-DNAJC17 Antibody猴磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）elisa定量检测试剂盒

蛋白激酶A(多肽)Anti-DNM1 Antibody猴鸟苷酸交换因子（GEF）elisa定量检测试剂盒

尿激酶型纤溶酶原激活因子（多肽）Anti-DNAL4 Antibody猴蛋白脂质蛋白抗体（PLP）elisa定量检测试剂盒
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

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