产品参数:
产品名称: 样本保存液含染料(橙黄色)
规格: 2.5L
货号:BH-P63231
公司产品仅用于科研分类:DNA提取试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结���是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](//yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)检测试剂盒英文名称:MPO-ANCA IgG ELISA KitADP核糖基化样因子ARL3抗体包装25g
髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体(MPO-ANCA)检测试剂盒英文名称:MPO-ANCA ELISA Kit花生四烯酸15脂氧合酶1抗体包装5g
髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒英文名称:MPO ELISA Kit癌增强蛋白2抗体包装1g
酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒英文名称:ACP ELISA Kitα1微球蛋白抗体包装100g
酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGF-1)检测试剂盒英文名称:aFGF/FGF-1 ELISA Kitα晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体包装25g
酸性β葡萄糖苷酶(GBA)检测试剂盒英文名称:GBA ELISA Kit腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体包装1mg
丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)检测试剂盒英文名称:Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1 ELISA KitAMPK的相关蛋白激酶5抗体包装1g
丝氨酸转肽酶抑制剂Kazal type 3(SPINK3)检测试剂盒英文名称:SPINK3 ELISA Kit致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体包装25g
丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)检测试剂盒英文名称:STK ELISA Kit腺苷脱氨酶抗体包装5g
通道蛋白9(AQP-9)检测试剂盒英文名称:AQP-9 ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体包装1g
通道蛋白5(AQP-5)检测试剂盒英文名称:AQP-5 ELISA KitATRNL1蛋白抗体包装25g
通道蛋白4(AQP-4)检测试剂盒英文名称:AQP-4 ELISA KitAFP4a蛋白抗体包装5g
通道蛋白3(AQP-3)检测试剂盒英文名称:AQP-3 ELISA Kit铁蛋白Fe65样蛋白1抗体包装250mg
通道蛋白2(AQP-2)检测试剂盒英文名称:AQP-2 ELISA Kit铁蛋白Fe65样蛋白2抗体包装25g
通道蛋白1(AQP-1)检测试剂盒英文名称:AQP-1 ELISA Kitβ淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体包装5g
样本保存液含染料(橙黄色)CDH9 Antibody蜡状芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus cereus
CDH8 Antibody黑木耳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CDK11B Antibody微球菌用途: 在无机盐培养中以100mg/L的邻苯二酚为碳源培养,3天内降解率大于90%
CDK1 Antibody枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis
CDK2 Antibody忠清南道盐单胞菌拉丁属名: Halomonas gomseomensis
CDK20 Antibody芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus sp.
CDK2AP1 Antibody绿木霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CDK2AP2 Antibody慕尼黑分枝杆菌拉丁属名: Mycobacterium monacense
CDK2AP1 Antibody枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis
CDK5R2 Antibody猪丹丝菌拉丁属名: rhuriopathiae