使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 组织保存液
规格: 100mL
货号:BH-P63235
公司产品仅用于科研分类:DNA提取试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
三碘状腺原氨酸(T3)检测试剂盒英文名称:T3 ELISA Kit二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体包装100g
乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)检测试剂盒英文名称:LF/LTF ELISA KitAKIRIN2蛋白抗体包装25g
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒英文名称:LDH ELISA KitADP核糖基化样因子8B抗体包装5g
溶菌酶(LZM)检测试剂盒英文名称:LZM ELISA Kit三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体包装1g
绒毛膜促性腺β(β-CG)检测试剂盒英文名称:β-CG ELISA KitAKIRIN1蛋白抗体包装5g
绒毛膜促性腺(CG)检测试剂盒英文名称:CG ELISA Kit锚定蛋白样蛋白1抗体包装1g
妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)检测试剂盒英文名称:PAPP-A ELISA Kit腺苷酸激酶2抗体包装5g
热休克因子1(HSF1)检测试剂盒英文名称:HSF1 ELISA Kit顶体前体蛋白抗体包装1g
热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)检测试剂盒英文名称:HSP gp96 ELISA Kit黑色素瘤缺失样蛋白1抗体包装5g
热休克蛋白90(HSP-90)检测试剂盒英文名称:HSP-90 ELISA Kit未知糖基化转移酶AER61抗体包装100g
热休克蛋白70(HSP-70)检测试剂盒英文名称:HSP-70 ELISA Kit铁蛋白Fe65抗体包装25g
热休克蛋白60(Hsp-60)检测试剂盒英文名称:Hsp-60 ELISA Kit抑癌基因ras同源家族1抗体包装5g
热休克蛋白40(Hsp-40)检测试剂盒英文名称:Hsp-40 ELISA Kit转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体包装100g
热休克蛋白27(HSP-27)检测试剂盒英文名称:HSP-27 ELISA Kit心钠素抗体包装25g
热休克蛋白20(Hsp-20)检测试剂盒英文名称:Hsp-20 ELISA Kit氨酰tRNA合成酶2抗体包装1g
组织保存液CELF1 Antibody枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis
CELSR2 Antibody灰色链霉菌拉丁属名: Streptomyces griseus
CELSR3/Flamingo homolog 1 Antibody杨奇青霉拉丁属名: Penicillium janczewskii
CELSR3 Antibody苏云金芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CENPQ Antibody皱瓣革菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CENPU Antibody解脂亚罗酵母拉丁属名: Yarrowia lipolytica
CEP135 Antibody地衣芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CEP131 Antibody竹针孢座囊菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CEP135 Antibody稻节杆菌拉丁属名: Arthrobacter oryzae
CEP152 Antibody砷、锑、铋、汞、银化物检测试剂 规格: 30份样品用量
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。