产品参数: 产品名称: DNA提取试剂盒 规格: 50次 货号:BH-P63213 公司产品仅用于科研分类:DNA提取试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 Reinforced Clostridial Medium人角膜上皮总RNA6-溴-2-萘酚FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor) 促卵泡受体抗原 哥伦比亚琼脂人角膜总RNA十二羰基三钌FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡抗原 Columbia Agar人视网膜色素上皮总RNA十二羰基三钌GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基丁A型受体α1抗原 沙氏葡萄糖肉汤人晶状体上皮总RNA十二羰基三钌GABAB1(GABAb Receptor 1) g-氨基丁B1受体(多肽) Sabouraud Dextrose Broth人虹膜色素上皮总RNA铁(III) 水合物GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基丁A型受体B2抗原 沙氏葡萄糖琼脂人结膜成纤维总RNA铬,水合GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷氨脱羧酶-67抗原 Sabouraud Dextrose Agar人无色 Tryptic Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium)peptide 表面趋化因子受体3抗原 Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium)人绒毛间叶成纤维总RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡基)-2GATA-4(GATA binding factor 4) homeobox) differntiation factor 8) 生长分化因子8抗原 Phosphate Buffer, pH 7.2人间充质干-脂肪总RNAN-叔丁氧羰基-O-苄基-L-苏氨GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 胶质源性神经营养因子抗原 缓冲-蛋白胨溶液pH7.0人间充质干-肝脏总RNAN-叔丁氧羰基-O-苄基-L-苏氨Gelsolin 凝溶胶蛋白抗原 BUFFERED SOD CHLOR PEPTONE人脐带间充质干总RNA3-甲氧基苯GFP 绿色荧光蛋白 液体硫乙盐培养基(FTM)人肺间充质干总RNA3-甲氧基苯GFP 绿色荧光蛋白 NIH硫乙盐肉汤人上皮总RNA3-甲氧基苯GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor) 糖皮质**诱导肿瘤坏死因子受体抗原 液体A(0.1%蛋白胨水)人成纤维总RNA(基膦)金GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游转录因子Gli1蛋白抗原 Fluid A人脐静脉内皮总RNA敌草胺GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide 胰高血糖素样肽-1(多肽) 液体D(0.1%蛋白胨水和吐温80)人脐动脉内皮总RNA乙基三苯基溴化磷GLP-1 peptide 胰高血糖素样肽-1(多肽) Fluid D人脐静脉平滑肌总RNA乙基三苯基溴化磷GLP-1R peptide 胰高血糖素样肽-1受体多肽 胰蛋白大豆肉汤人脐动脉平滑肌总RNA乙基三苯基溴化磷GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖转运蛋白3抗原 Tryptic Soy Broth人脑微血管内皮微RNA2--3--5-吡GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) A33(跨膜)抗原 Bacto? Peptone人脑血管周微RNA2--4-吡glypican 1 磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原 脱脂奶人脉络丛内皮微RNA2--4-吡GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽) Skim Milk人脉络丛上皮微RNA2--4--3-甲基吡Glypican 4(Glypican proteoglycan 4) 磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原 LB肉汤,Lennox人脉络丛成纤维微RNA2--4--3-甲基吡GRB2/ASH peptide 生长因子受体结合蛋白2抗原 LB Broth, Lennox人脑膜微RNA2--4-吡-3-甲GZMB/CCPI(Granzyme B) 颗粒酶B抗原 BactoTM琼脂人神经元微RNA2--4--5-甲基吡UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor:G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶联受体14抗原 BactoTM Agar人脑颗粒微RNA2--4--5-甲基吡GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶联受体30抗原 平板计数琼脂人海马趾神经元微RNA2--4--5-甲基吡GnRHR peptide 促性受体抗原 Plate Count Agar人少突胶质前体微RNA乙氧甲酰基三苯基溴化膦KiSS-1R/GPR54/GPCR54(KiSS-1 receptor/G-Protein Coupled Receptor 54) D/E (Dey/Engley) Neutralizing Agar人脊髓星形胶质微RNA双芬phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷化葡萄糖合成激酶3α/β抗原 D/E中和肉汤人海马趾星形胶质微RNA双芬GSR/GRase(glutathione Nutrient Agar人表皮黑色素-中色素微RNA4-溴异喹啉H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原 麦芽浸出液琼脂人表皮黑色素-深色素微RNA4-溴异喹啉Haase(hyaluronidase) 透明质酶/玻璃酶抗原 Malt Extract Agar人成纤维-胎儿微RNA4-溴异喹啉HA tag HA tag标签多肽 Fluid Lactose Medium人成纤维-新生儿微RNA4,4′-双(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HA tag(map) HA tag标签(分支多肽) Baird-Parker琼脂基础人成纤维-微RNA4,4′-双(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝生长因子激活物抑制因子抗原 Baird-Parker Agar Base人毛微RNA六铑三铵HBA1(hemoglobin alpha 1) 人类血红蛋白α1抗原 卵黄亚碲盐增菌液人基质微RNA3,5-二-4-基吡VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原 EY lurite Enrichment人外根壳微RNA3,5-二-4-基吡URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原 1%亚碲盐溶液人内根壳微RNA柠檬镁九水合物URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病X蛋白(HBxAg)C端抗原 lurite Solution人内皮微RNABexaroteneBeta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta) 人beta 亚基人绒毛膜促性腺抗原 L-EMB琼脂(伊红美蓝琼脂)人成纤维微RNA1535-65-5Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亚基人绒毛膜促性腺多肽抗原 Eosin Methylene Blue Agar, Levine人口腔角质微RNA1535-65-5HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱肿瘤抗原 DNA提取试剂盒脑心浸液人牙龈成纤维微RNAD-薄荷CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗原 Brain Heart Infusion人牙周膜成纤维微RNAD-薄荷HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受体抗体(N端) 50170人食道上皮微RNAD-薄荷HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受体抗原(N端) 50171人食道平滑肌微RNA2-(氧基)苯胺HGF(hepatocyte growth factor) 肝生长因子抗原 50160人肠微血管内皮微RNA2-(氧基)苯胺