产品参数:
产品名称: 非冻型唾液DNA保存液
规格: 250 mL
货号:BH-P63243
公司产品仅用于科研分类:DNA提取试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,���将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
磷酸肌醇3激酶(PI3K)检测试剂盒英文名称:PI3K ELISA Kit自噬相关蛋白4D抗体包装25g
磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)检测试剂盒英文名称:pAMPK ELISA Kit自噬相关蛋白9A抗体包装5g
磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)检测试剂盒英文名称:p-ERK ELISA Kit缩酶C抗体包装500mg
磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)检测试剂盒英文名称:pERK ELISA Kit谷草转氨酶抗体包装100g
磷酸化酪氨酸蛋白激酶JAK3(pJAK3)检测试剂盒英文名称:pJAK3 ELISA Kit三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员5抗体包装25g
磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)检测试剂盒英文名称:p-NF-κB ELISA Kit三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体包装500g
磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)检测试剂盒英文名称:P-PKC ELISA Kit酰基辅酶A脱氢酶长链抗体包装25g
磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)检测试剂盒英文名称:P-PKB ELISA Kit酰基辅酶A脱氢酶中链抗体包装5g
磷酸化表皮生长因子受体(pEGFR)检测试剂盒英文名称:pEGFR ELISA Kit酰基辅酶A脱氢酶短链抗体包装1g
磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)检测试剂盒英文名称:P-JNK ELISA Kit过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1抗体包装25g
细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)检测试剂盒英文名称:Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit磷酸化凋亡信号调节激酶1抗体包装5g
细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)检测试剂盒英文名称:LFA-3/CD58 ELISA Kit转化生长因子β诱导蛋白3抗体(半胱氨酸和丝氨酸富含核蛋白1)包装1g
亮氨酸脑啡肽(Leu-ENK)检测试剂盒英文名称:Leu-ENK ELISA Kit有丝分裂激酶A/B/C抗体包装5g
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)检测试剂盒英文名称:GM-CSF ELISA Kit蛋白酪氨酸激酶ATK抗体包装1g
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)检测试剂盒英文名称:G-CSF ELISA Kit长链脂肪酸辅酶A连接酶1/2抗体包装1g
非冻型唾液DNA保存液CLDN1 Antibody微小链霉菌拉丁属名: Streptomyces parvulus
CLDN10 Antibody细小砖红镰孢菌用途: 植物病原物,用于该菌种群遗传学研究;为该病防治提供依据
CLDN19 Antibody沼泽类芽孢杆菌拉丁属名: Paenibacillus aestuarii
CLDN2 Antibody不动杆菌用途: 微生物肥料
CLDN19 Antibody黄曲霉拉丁属名: Aspergillus flavus
CLDN3 Antibody大肠埃希氏菌拉丁属名: Escherichia coli
CLDN5 Antibody酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
CLDN3 Antibody香菇拉丁属名: Lentinula edodes
CLDN6 Antibody大肠埃希氏菌拉丁属名: Escherichia coli
CLDN7 Antibody英诺克李斯特氏菌拉丁属名: Listeria innocua