产品参数:
产品名称: 通用型蛋白酶抑制剂混合液,100X
规格: 1 mL
货号:BH-P63246
公司产品仅用于科研分类:DNA提取试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)检测试剂盒英文名称:PCNA ELISA Kit肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体包装5ml
抗胰蛋白酶(AT)检测试剂盒英文名称:AT ELISA Kit蛋白激酶A2抗体包装1g
抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)检测试剂盒英文名称:PA-IgG/M/A ELISA Kit血管紧张素Ⅱ受体2抗体包装5g
抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)检测试剂盒英文名称:ACA-IgM ELISA KitASH1蛋白抗体包装100g
抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)检测试剂盒英文名称:ACA-IgG ELISA Kit芳香乙酰脱乙酰基酶样蛋白2抗体包装25g
抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)检测试剂盒英文名称:ACA-IgA ELISA Kit血管内皮迁移蛋白抗体包装5g
抗心肌抗体(AMA)检测试剂盒英文名称:AMA ELISA Kit糖还原酶相关蛋白质抗体包装100g
抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)检测试剂盒英文名称:snRNP/Sm ELISA Kit胆汁酸结合蛋白DDH2抗体包装25g
抗线粒体抗体(AMA)检测试剂盒英文名称:AMA ELISA Kit血管**素样蛋白3抗体包装500g
抗透明带抗体IgG(aZP-IgG)检测试剂盒英文名称:aZP-IgG ELISA Kit甘油酯激酶线粒体抗体包装50MG
抗透明带抗体(aZP)检测试剂盒英文名称:aZP ELISA Kit磷酸化内收蛋白a1抗体包装25ml
抗双链DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒英文名称:dsDNA ELISA Kit自噬体ATG16L2蛋白抗体包装1g
抗平滑肌抗体(ASMA)检测试剂盒英文名称:ASMA ELISA Kit酸性磷酸酶抗体包装100g
抗凝血酶受体(ATR)检测试剂盒英文名称:ATR ELISA Kit酸性磷酸酶抗体包装25g
抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)检测试剂盒英文名称:AT-Ⅲ ELISA Kit光激酶A相互作用蛋白1抗体包装25g
通用型蛋白酶抑制剂混合液,100XCMTM1 Antibody酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
CMTM1 Antibody地衣芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus licheniformis
CMTM2 Antibody血红鞘氨单胞菌拉丁属名: Sphingomonas sanguinis
CMTM2 Antibody大肠埃希菌拉丁属名: coli
CMTM4 Antibody德尔布有孢酵母拉丁属名: Torulaspora delbrueckii
CMTM3 Antibody竹喙球菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CMTM3 Antibody敏捷食菌拉丁属名: Acidovorax facilis,72W
CMTM5 Antibody动性球菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
CMTM6 Antibody假单胞菌用途: 微生物肥料
CMTM6 Antibody浅黄链霉菌拉丁属名: Streptomyces flaveolus