公司产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称
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狂犬病病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒
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规格
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50次
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货号
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BH-P63382
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组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
乙酸阿比特龙酯英文名称: Dorzolamide HCl富含半胱氨酸C端蛋白1抗体包装5g
异环磷酰英文名称: Doxazosin MesylateE1A激活基因激蛋白2抗体包装1g
扎西他滨,2',3'-二脱氧胞苷英文名称: Doxazosin Mesylate壁合成蛋白43抗体包装5g
子囊霉素英文名称: Doxorubicin HCl/Adriamycin19号染色体开放阅读框29抗体包装1g
紫杉英文名称: Doxorubicin HCl/Adriamycin磷酸化p21蛋白抗体包装250mg
左亚叶酸钙;酰四氢叶酸钙英文名称: Doxycycline HCl磷酸化周期检测点激酶2抗体包装25g
阿卡地新(AICAR)英文名称: Doxycycline HCl磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体包装5g
阿利克仑半富马酸盐英文名称: Menadione磷酸化周期素依赖性激酶2抗体包装100g
阿齐沙坦英文名称: Menadione磷酸化周期检测点激酶1抗体包装25g
阿昔莫司,阿西莫司英文名称: Econazole nitrate磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体包装25g
阿折地平英文名称: Econazole nitrate磷酸化α-连环蛋白抗体包装5g
安倍生坦英文名称: Entecavir周期素E2抗体包装5g
氨力农英文名称: Entecavir磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶CAMK2B/D/G抗体包装250mg
氨地平英文名称: Epalrestat 肿瘤易感候选基因3抗体包装100g
奥美沙坦;奥美沙坦酸英文名称: Epirubicin HCl磷酸化肿瘤易感候选基因3抗体包装25g
狂犬病病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒MRGPRX4 Antibody河北木霉拉丁属名: Trichoderma hebeiense
MRPL11 Antibody四绕曲霉拉丁属名: Aspergillus quadricinctus
MRPL12 Antibody酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
MRPL12 Antibody植物乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus plantarum
MRPL13 Antibody损蘑菇紫色杆菌拉丁属名: Janthinobacterium agaricidamnosum
MRPL16 Antibody斜卧青霉拉丁属名: Penicillium decumbens
MRPL14 Antibody灵芝(红芝, 赤芝)拉丁属名: Ganoderma lucidum
MRPL13 Antibody原市土地杆菌拉丁属名: Pedobacter suwonensis
MRPL15 Antibody乳杆菌属拉丁属名: Lactobacillus sp.
MRPL18 Antibody嗜中温寒冷杆菌拉丁属名: Frigoribacterium sp.
公司即用型PCR试剂盒:
是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。