使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 人**瘤病毒通用PCR试剂盒
规格: 50次
货号:BH-P63462
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
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PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
托吡卡(标准品)英文名称: NateglinideDIP13β抗体包装1g
托吡酯(标准品)英文名称: Nateglinide胎盘和前列腺相关蛋白DLG5抗体包装1g
托伐普坦(标准品)英文名称: "(-)scopolamine N-butyl bromide "接头蛋白DOK7抗体包装10g
托芬那酸(标准品)英文名称: Tannic acid特异性DMRT3蛋白抗体包装50g
托拉塞米(标准品)英文名称: Maraviroc桥粒芯糖蛋白2抗体包装1g
托萘酯(标准品)英文名称: Revalor-H Trenbolone acetate溶酶体丝氨酸蛋白酶DPP2抗体包装250mg
托品(盐酸托烷司琼杂质)(标准品)英文名称: SilibininNotch信号通路Delta样配体4抗体包装1g
托品酸(标准品)英文名称: Silibinin动力相关蛋白1抗体包装5g
托品酸N-异基去托品酯(标准品)英文名称: Ezetimibe形态发生紊乱关联激活因子1抗体包装1g
托曲珠利;妥曲珠利(标准品)英文名称: Ezetimibe磷酸化DNA基转移酶1抗体包装25g
托瑞米芬(标准品)英文名称: Mepivacaine HCl磷酸化DDX58抗体包装5g
拖拉塞米杂质A(4-(3-氨基)-3-吡啶磺酰...英文名称: Amprenavir磷酸化DDX58抗体包装100ml
脱羧雷他定/地雷他定(标准品)英文名称: Rubitecan磷酸化结蛋白抗体包装1g
妥布霉素(标准品)英文名称: Polyethylene-polypropylene glycol磷酸化结蛋白抗体包装5g
妥布霉素(标准品)英文名称: Catharanthine hemitartrate二价金属转运蛋白1抗体包装5g
人**瘤病毒通用PCR试剂盒Phospho TPH1 (Ser58) Antibody澳大利亚荚孢腔菌拉丁属名: Sporormiella australis
Phospho XIRP1 (Ser295) Antibody樟疫霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
Phospho-ASAP1 Y782 Antibody聚生壳菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
Phospho ZNF598 (Tyr306) Antibody冻土毛霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
Phospho-CaM Kinase II (Thr286) Antibody香蕉用途: 植物病原菌
Phospho-Aurora B pT232 Antibody酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
Phospho TPH2 (Ser19) Antibody干草寒冷杆菌拉丁属名: Frigoribacterium faeni
Phospho-CaM Kinase II (Thr306) Antibody啤酒酵母注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
Phospho YWHAB (Ser58) Antibody栗疫菌拉丁属名: Cryphonectria parasitica
Phospho-Dynamin (Ser774) Antibody盘孢菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。