产品参数:
产品名称: 乙型肝炎病毒通用型探针法荧光定量PCR试剂盒
规格: 50次
货号:BH-P63506
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
宝藿苷V英文名称: Barium carbonate内皮素-1抗体包装25ml
宝藿苷VII英文名称: Benzamide丝裂原活化蛋白激酶4抗体包装5ml
杯苋甾酮(标准品)英文名称: Biebrich scarlet埃兹蛋白抗体包装1g
北苍术(标准品)英文名称: Calcium citrate, tetrahydrate转录因子ELK1抗体包装100g
北豆根(标准品)英文名称: Cesium sulfate内皮素-1单克隆抗体包装25g
北美芹素英文名称: Copper sheet肠道病71型抗体包装5g
北美芹素(标准品)英文名称: Copper(I) chloride抗志贺素大肠杆菌O139抗体(仔猪肿病志贺素大肠杆菌O139)包装25g
北五加皮苷M;杠柳苷M英文名称: Copper (I) iodide表皮生长因子抗体包装5g
北五加皮苷N;杠柳苷N英文名称: dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate disodium salt表皮生长因子抗体包装1g
贝萼皂苷元英文名称: D-Glucuronic acid, sodium salt, monohydrate磷酸化真核翻译延长因子2抗体包装250mg
贝萼皂苷元-3- O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名称: Ficol 70真核延伸因子激酶2抗体包装1g
贝母花(标准品)英文名称: Guanidine carbonate磷酸化真核延伸因子激酶2抗体包装1g
贝母素(标准品)英文名称: Hydrazine hydrochloride真核启动因子2α抗体(eIFα2)包装1g
贝母素乙(标准品)英文名称: Iron(III) sulfate, hydrate磷酸化一氧化氮合成酶3(内皮型)抗体包装250mg
贝母辛(标准品)英文名称: Methyl gallate真核翻译延长因子2抗体包装5g
乙型肝炎病毒通用型探针法荧光定量PCR试剂盒RPS25 Antibody四川散斑壳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
RPS23 Antibody嗜热脂肪芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus stearothermophilus
RPS27L Antibody热带假丝酵母拉丁属名: Candida tropicalis
RPS3 Antibody蜡叶曲霉拉丁属名: Aspergillus herbariorum
RPS4Y1 Antibody酒色青霉拉丁属名: Penicillium vinaceum
RPS6KA1 Antibody日光盐场喜盐芽孢杆菌拉丁属名: Halobacillus yeomjeoni
RPS4X Antibody赖氏毛壳拉丁属名: Chaetomium raii
RPS6 Antibody黑曲霉拉丁属名: Aspergillus niger
RPS6KA1 Antibody大肠杆菌拉丁属名: Escherichia coli
RPS6KA2 Antibody*热脂环芽胞杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用