产品参数:
产品名称: 黄头病毒RT-PCR试剂盒
规格: 50次
货号:BH-P63558
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引��与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
雷公藤内酯(标准品)英文名称: Tantalum standard磷酸化gamma氨基丁酸B型受体1抗体包装100mg
雷公藤内酯酮(标准品)英文名称: lurium standard磷酸化谷氨酸受体2抗体包装25g
雷公藤宁碱A英文名称: Terbium standard磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体包装5g
雷公藤乙素(标准品)英文名称: Vanadium solution珠蛋白转录因子1抗体包装10g
类叶升麻苷,毛蕊花糖苷(标准品)英文名称: Yttrium standard谷胱甘肽过氧化酶3包装1g
藜芦英文名称: Zinc standard谷胱甘肽过氧化酶4抗体包装1g
里卡灵A英文名称: Zinc standard高尔基体膜蛋白GP73抗体包装5g
利卡灵-B;利卡灵B英文名称: Vamidothion standard solutionG蛋白偶联受体172B抗体包装1g
利血平(标准品)英文名称: Vacuum pump oil中心B相关蛋白2抗体包装1g
栎樱酸(标准品)英文名称: Vacuum pump oilG蛋白转录因子α3抗体包装5g
连钱草(标准品)英文名称: Vacuum pump oilG蛋白偶联受体124抗体(肿瘤血管内皮标记物)包装10ml
连翘(标准品)英文名称: Vacuum pump oil半乳糖凝集素1抗体包装50ml
连翘苷(标准品)英文名称: Violuric acid monohydrateα葡萄糖苷酶2抗体包装25g
连翘酯苷A(标准品)英文名称: Vitamin E acetate半乳糖凝集素7抗体包装25g
连翘酯苷B(标准品)英文名称: Uniconazole特异性囊肿病液体蛋白15抗体包装5g
黄头病毒RT-PCR试剂盒TRADD Antibody链球菌(不定种)拉丁属名: sp.
TRA2A Antibody大肠埃希氏杆菌拉丁属名: Escherichia coli
TRA2A Antibody蜡样芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus cereus
TRADD Antibody罗伦隐球酵母罗伦变种拉丁属名: Cryptococcus laurentii var. laurentii
TRAF3IP2 Antibody谷氨棒杆菌拉丁属名: Corynebacterium glutamicum
TRAPPC1 Antibody瘿青霉拉丁属名: Penicillium fellutanum
TRAF3IP3 Antibody酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
TRAF5 Antibody顶青霉拉丁属名: Penicillium corylophilum
TRAPPC3 Antibody白灵侧耳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
TRAPPC6A Antibody干酪乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus casei