PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 粪肠球菌PCR试剂盒 规格： 50次 货号：BH-P63603 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 伪金丝桃素英文名称： D-Ribose 5-phosphate disodium salt hydrate组受体H1抗体包装1g 伪原薯蓣皂苷(标准品)英文名称： Hematoxylin同源盒蛋白HOXA9抗体包装5g 委陵菜（标准品）英文名称： Adenosine 5‘-monophosphate sodium salt同源盒蛋白HOXB5抗体包装1g 卫矛碱英文名称： CTP.Na2肝粘附分子抗体包装25g 文多灵(标准品）英文名称： 5-Methyluridine磷酸化组蛋白去乙酰化酶5抗体包装5g 乌金苷（标准品）英文名称： 2,2'-O-Cyclouridine磷酸化组蛋白去乙酰化酶1抗体包装5g 乌灵菌粉（标准品）英文名称： X-gal磷酸化组蛋白去乙酰化酶2抗体包装1g 乌梅（标准品）英文名称： Fluorescamine磷酸化HOMER3蛋白抗体包装25g 乌梢蛇（标准品）英文名称： 4-Chloro-1-naphthol (4-CN)转化蛋白p21抗体（原癌基因H-ras抗体）包装5g 乌药（标准品）英文名称： Avidin from egg white转录因子HES-1抗体包装100g 乌药英文名称： Streptavidin from Streptomyces avidinii组蛋白H4-K4基转移酶抗体包装25g 乌药内酯（标准品）英文名称： Sitafloxacin HydrateHOMER3蛋白抗体包装5g 粪肠球菌PCR试剂盒乌药内酯英文名称： DHBS磷酸化HER3受体抗体包装10KU 乌贼墨（标准品）英文名称： Disodium beta-glycerophosphate pentahydrate磷酸化HER4抗体包装250mg 吴茱萸（标准品）英文名称： Fura 2-AM磷酸化HER4抗体包装100g
PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 粪肠球菌PCR试剂盒 规格： 50次 货号：BH-P63603 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 伪金丝桃素英文名称： D-Ribose 5-phosphate disodium salt hydrate组受体H1抗体包装1g
伪原薯蓣皂苷(标准品)英文名称： Hematoxylin同源盒蛋白HOXA9抗体包装5g
委陵菜（标准品）英文名称： Adenosine 5‘-monophosphate sodium salt同源盒蛋白HOXB5抗体包装1g
卫矛碱英文名称： CTP.Na2肝粘附分子抗体包装25g
文多灵(标准品）英文名称： 5-Methyluridine磷酸化组蛋白去乙酰化酶5抗体包装5g
乌金苷（标准品）英文名称： 2,2'-O-Cyclouridine磷酸化组蛋白去乙酰化酶1抗体包装5g
乌灵菌粉（标准品）英文名称： X-gal磷酸化组蛋白去乙酰化酶2抗体包装1g
乌梅（标准品）英文名称： Fluorescamine磷酸化HOMER3蛋白抗体包装25g
乌梢蛇（标准品）英文名称： 4-Chloro-1-naphthol (4-CN)转化蛋白p21抗体（原癌基因H-ras抗体）包装5g
乌药（标准品）英文名称： Avidin from egg white转录因子HES-1抗体包装100g
乌药英文名称： Streptavidin from Streptomyces avidinii组蛋白H4-K4基转移酶抗体包装25g
乌药内酯（标准品）英文名称： Sitafloxacin HydrateHOMER3蛋白抗体包装5g
粪肠球菌PCR试剂盒乌药内酯英文名称： DHBS磷酸化HER3受体抗体包装10KU
乌贼墨（标准品）英文名称： Disodium beta-glycerophosphate pentahydrate磷酸化HER4抗体包装250mg
吴茱萸（标准品）英文名称： Fura 2-AM磷酸化HER4抗体包装100g