PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 节杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 规格： 50次 货号：BH-P63610 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 辛夷（望春花）（标准品）英文名称： L-Glutamic acid 5-methyl ester铁调节蛋白25抗体包装100g 辛夷脂素(标准品)英文名称： N-Acetyl-L-leucineHD域内含蛋白2抗体包装25g 新补骨脂异黄酮(标准品)英文名称： L-Orn(Z)-OH艾滋病病p55抗体包装5g 新橙皮苷(标准品)英文名称： N-Acetyl-L-phenylalanine造血激酶抗体包装1g 新橙皮苷二氢查尔酮(标准品)英文名称： L-ProlinamideHEAT重复内含蛋白5B蛋白抗体包装25g 新穿心莲内酯（标准品）英文名称： N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine缺氧诱导基因1B蛋白抗体包装5g 新地奥斯明英文名称： O-Benzyl-L-serine乙酰化组蛋白H4抗体包装1g 新绿原酸(标准品)英文名称： O-tert-Butyl-L-serine 热休克蛋白B2抗体包装5g 新芒果苷(标准品)英文名称： CAL-101 (GS-1101)人类白抗原B27包装25MG 新藤黄酸(标准品)英文名称： O-tert-Butyl-L-threonine螺旋环螺旋转录因子HATH6抗体包装25g 新乌头原碱（标准品）英文名称： L-dopa,Levodopa神经调节蛋白1β2抗体包装5g 杏叶防风（标准品）英文名称： L-dopaHDHD3蛋白抗体包装1g 节杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒雄蚕蛾（家蚕）（标准品）英文名称： L-a-Aminoadipic acidHEATR3蛋白抗体包装5g 熊胆粉（标准品）英文名称： L-Cyclopropylalanine癌增强蛋白抗体包装1g 熊果苷（标准品）英文名称： L-Homophenylalanine单基组蛋白H3K9抗体包装25g
PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 节杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 规格： 50次 货号：BH-P63610 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 辛夷（望春花）（标准品）英文名称： L-Glutamic acid 5-methyl ester铁调节蛋白25抗体包装100g
辛夷脂素(标准品)英文名称： N-Acetyl-L-leucineHD域内含蛋白2抗体包装25g
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熊胆粉（标准品）英文名称： L-Cyclopropylalanine癌增强蛋白抗体包装1g
熊果苷（标准品）英文名称： L-Homophenylalanine单基组蛋白H3K9抗体包装25g