产品参数:
产品名称: 龟分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
规格: 50次
货号:BH-P63616
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
野菊花(标准品)英文名称: D-Tyrosine磷酸化HER4抗体包装25g
野马追(标准品)英文名称: D-Histidine糖蛋白β-1B抗体包装500g
野马追内酯A(标准品)英文名称: D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride磷酸化热休克蛋白27抗体包装50mg
野马追内酯B(标准品)英文名称: D-Alanine tert-Butyl Ester HydrochlorideHEAT重复内含蛋白7A蛋白抗体包装1g
野马追内酯K英文名称: D-Arginine人瘤病16型E7抗体包装5g
野牡丹(标准品)英文名称: ADMAHER2抗体包装1g
野木瓜(标准品)英文名称: N'-Nitro-D-arginine 人胎盘泌乳素抗体包装5g
野漆树苷(标准品)英文名称: D-Asparagine monohydrate热休克蛋白27抗体包装25g
叶黄素; 二羟基-d-胡萝卜素(标准品)英文名称: D-Aspartic acid 高迁移率族蛋白A1抗体包装5g
叶酸(标准品)英文名称: D-Aspartic acid 4-tert-butyl ester磷酸化HER2受体抗体包装1g
叶下珠(标准品)英文名称: D-Glutamic acid热休克蛋白-20抗体包装25g
夜香牛(标准品)英文名称: Nα-Tosyl-L-lysine chloromethyl ketone HCl羟乙基淀粉抗体包装5g
一点红(标准品)英文名称: Glycyl-L-tyrosineA型流感病H1N1-M2蛋白抗体包装100g
一叶秋碱 ,一叶萩碱(标准品)英文名称: D-Leucine亨丁顿舞蹈症相互作用蛋白12抗体包装25g
一枝黄花(标准品)英文名称: H-D-Lys-OH·HCl单纯疱疹病1型DNA聚合酶催化亚单位抗体包装5g
龟分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒兔子α2抗纤溶酶黄芩素Human
小鼠乳脱氢酶黄芩素(标准品)Human, Mouse
大鼠高铁血红蛋白黄藤素Human, Mouse
风疹胞病 IgM(捕获法二步法)黄芫花(标准品)Human
弓形虫抗体 IgG(间接法二步法)黄杨(标准品)Human, Rat
弓形虫抗体 IgM(间接法二步法)黄钟花醌;拉帕 (标准品)Human, Mouse
弓形虫抗体 IgM(捕获法一步法)灰毡毛忍冬皂苷Human, Mouse, Rat
弓形虫抗体 IgM(捕获法二步法)灰毡毛忍冬皂苷乙(标准品)Human, Mouse, Rat
单纯疱疹Ⅰ型病 IgG(间接法二步法)茴芹内酯(标准品)Human, Mouse, Rat
脂肪酸去饱和酶1抗体COX10/FITC 荧光素标记COX10抗体IgG
回肠脂肪酸结合蛋白抗体IAA/FITC 荧光素标记吲哚-3-乙酸抗体/植物生长素抗体IgG