产品参数:
产品名称: 巨大芽孢杆菌染料法qPCR试剂盒
规格: 50次
货号:BH-P63631
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
2''-O-p-反式香豆酰基荭草苷英文名称: Boc-Val-OH葡萄糖氧化酶1抗体包装1g
2''-O-p-香豆酰基牡荆素英文名称: Boc-Asn-OH转录调节因子HOXD9抗体包装5g
2''-O-鼠李糖基羊藿次苷II英文名称: Boc-Gln-OH羟基酰谷胱甘肽解酶样蛋白抗体包装1g
2'-O-基苦参酮英文名称: Boc-Ala-OSu热休克蛋白受体家族蛋白7B2抗体包装25g
2,3,5,4-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷英文名称: Boc-D-Ala-OHHeme结合蛋白2抗体包装5g
2,3,5,4-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷(标...英文名称: Boc-ß-Ala-OH肝粘附分子2抗体包装1g
2,3-脱氢维酮英文名称: Boc-ß-iodo-Ala-OMe氨基己糖苷酶D抗体包装5g
2,5,9-三羟基-4-氧基-9,10-二氢菲英文名称: Boc-Arg-OH·HCl·H2OHHLA2蛋白抗体包装1g
20(21)-脱氢赤芝酸A英文名称: Nalpha-BOC-D-Arginine hydrochloride hydrate羟脯氨酸抗体包装250mg
20(S)-原人参三(标准品)英文名称: Boc-Arg(Mts)-OH·CHA热休克蛋白10抗体包装5g
21-O-顺芷酰基匙羹藤新苷元英文名称: Boc-Arg(NO2)-OH同源盒蛋白PRH抗体包装1g
23-羟基龙吉苷元英文名称: Boc-N-beta-Trityl-L-asparagine 羟类固脱氢酶17β抗体包装5g
23-乙酰去氢泽泻B英文名称: Boc-Asn-(Xan)-OH疱疹病相关泛素特异性蛋白酶7抗体包装1g
23-乙酰泽泻B;泽泻B醋酸酯(标准品)英文名称: Boc-L-Asp(OBzl)-OH同源异型盒基因HOXA5蛋白抗体包装5g
24-乙酰泽泻F英文名称: Boc-L-Asp(OcHex)OH异染色质蛋白1-α(HP1α)抗体包装1g
巨大芽孢杆菌染料法qPCR试剂盒外周苯二氮受体抗体3(R,S)-羟去氧孕烯 Ethyltriphenylphosphonium Iodide
雄**诱导增殖抑制蛋白抗体3,17β-O-二(氧)雌二 1-Hexyl-2,3-dimethylimidazolium Iodide
磷化丝氨抗体3,2',3',4'-四乙酰炔雌 17-β-D-葡... Isopropyltriphenylphosphonium Iodide
中心粒周蛋白抗体缬草根标准品试剂盒 VALERIAN ROOT HP-TLC STANDARDS KIT(AHP)Human, Mouse, Rat
小鼠增殖核抗原单克隆抗体黑升麻植物提取物试剂盒 BLACK COHOSH BRM KIT(SH)Fusion proteins containing the HIS Tag
磷化视网膜母瘤样蛋白p107抗体玉米黄质测定试剂盒 ZEAXANTHIN METHOD VERIFICATION KIT(P)FITC
蛋白酶体PSMβ3抗体南非醉茄标准品试剂盒 ASHWAGANDHA STANDARDS KIT(SH)Fusion proteins containing the HA Tag
蛋白酶体PSMβ6抗体南非醉茄标准品试剂盒 ASHWAGANDHA STANDARDS KIT(SH)Fusion proteins containing the Flag Tag
蛋白酶体PSMβ7抗体脂溶性维生素标准品试剂盒(10种) VITAMIN STANDARDS KIT: FAT SOLUBLE(P)Fusion proteins containing the c-Myc Tag
果糖-3激酶抗体IGF-1 R/FITC 荧光素标记胰岛素样生长因子-I受体抗体IgG
精结合蛋白3抗体IGF-1R/FITC 荧光素标记胰岛素样生长因子-I受体抗体IgG