产品参数:
产品名称: 猫白血病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
规格: 50次
货号:BH-P63649
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
苯酰新乌头原碱(标准品)英文名称: Regorafenib(BAY 73-4506)内皮凝集素HL1抗体包装1g
苯酰氧化芍药苷英文名称: Ostarine,GTx-024干扰素α抗体包装250mg
比枯枯灵,右旋荷包牡丹碱(标准品)英文名称: XTT sodium salt白介素-17F抗体包装1g
荜茇(标准品)英文名称: (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone白介素6抗体(N端)包装5g
荜澄茄(标准品)英文名称: (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone白介素6抗体包装1g
蓖麻子(标准品)英文名称: Macitentan干扰素epsilon 1蛋白抗体包装25g
蝙蝠葛碱(标准品)英文名称: M344磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体包装5g
蝙蝠葛诺林碱(标准品)英文名称: 2-Nitroimidazole磷酸化白介素1受体1抗体包装25g
蝙蝠葛苏林碱(标准品)英文名称: 4-(Trifluoromethyl)-1H-imidazole白介素3抗体包装5g
扁柏双黄酮(标准品)英文名称: 2-Methyl-4-trifluoromethylimidazole异戊烯焦磷酸1抗体包装1g
扁桃苷/苦杏仁苷(标准品)英文名称: 2-Aminoimidazole hemisulfate磷酸化胰岛素受体底物-1抗体包装25g
扁蓄苷(标准品)英文名称: Odanacatib;MK0822磷酸化胰岛素受体底物-1抗体包装5g
表白桦脂酸(标准品)英文名称: 4-NITROCATECHOL胰岛素诱导基因1抗体包装1mg
表儿茶素(标准品)英文名称: 4-NITROCATECHOLFC段γ受体3/球蛋白G Fc段受体III抗体包装1g
表儿茶素没食子酸酯(标准品)英文名称: Troglitazone(CS-045)磷酸化白介素-1受体相关激酶4抗体包装25g
猫白血病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒味觉受体蛋白家族2亚7抗体**樟脑 CAMPHOR, (-)-(RG)Human
味觉受体蛋白家族2亚50抗体D-樟脑 CAMPHOR, (+)-(SG)Human
扭转原肠胚形成同源蛋白1抗体辛乙酯 CAPRYLIC ACID ETHYLESTER(SG)Human, Mouse
Tuftsin蛋白抗体辛乙酯 CAPRYLIC ACID ETHYLESTER(SG)Human, Mouse
跨膜蛋白161A抗体辛 CAPRYLIC ACID(AS)Human, Mouse, Rat
原癌因8抗体辛 CAPRYLIC ACID(AS)Human
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8抗体己酯 CAPROIC ACID METHYLESTER(AS)Human
TBC结构域TBCD4蛋白抗体己酯 CAPROIC ACID METHYLESTER(AS)Human
肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体正己乙酯 CAPROIC ACID ETHYLESTER(SG)Human, Mouse
FBXO28蛋白抗体phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC 荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG
FBXW5蛋白抗体Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC 荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制剂抗体IgG