PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 人博卡病毒PCR试剂盒 规格： 50次 货号：BH-P63668 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 鹅不食草（标准品）英文名称： 6-O-Benzylguanine(O6BG)JWA蛋白抗体包装100g 厄弗酚英文名称： Hypocrellin连接蛋白JPH3抗体包装25g 饿蚂蝗（标准品）英文名称： Fluorometholone连接粘附分子C抗体包装5g 蒽醌(标准品)英文名称： Fluorometholone蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗体包装100g 儿茶(儿茶)（标准品）英文名称： Acemetacin组蛋白去基化酶JMJ2A抗体包装25g 儿茶素没食子酯酸英文名称： Acemetacin组蛋白去基化酶JMJD5抗体包装5g 二苯基庚烷A（标准品）英文名称： Chlorpromazine HCl磷酸化γ连环蛋白抗体包装1g 二羟茶碱（标准品）英文名称： Chlorpromazine HClJNK相互作用蛋白4抗体包装5g 二氢丹参酮I（标准品）英文名称： Dirithromycin氨基末端激酶1/2抗体包装1g 二氢辣椒碱（标准品）英文名称： Dirithromycin氨基末端激酶1/2/3抗体包装1g 二氢猕猴桃内酯,奇异果内酯(标准品)英文名称： (2S)-2-amino-5-[(N,N'-dimethylcarbamimidoyl)amino]pentanoic acid氨基末端激酶1/3抗体包装25g 二氢欧山芹当归酸酯（标准品）英文名称： Ceftizoxime sodium连接蛋白JPH4抗体包装5g 二氢小檗碱（标准品）英文名称： Ceftizoxime sodium组蛋白去基转移酶JMJD7抗体包装1g 二氢杨梅素(标准品)英文名称： Pyrogallol磷酸化原癌基因c-Jun抗体包装1g 二氢醉椒素英文名称： Trametinib (GSK1120212)磷酸化活化蛋白激酶D抗体包装10MG 人博卡病毒PCR试剂盒无水氧化钡 乙二钡 原磷钡 化锌 二乙锌 过氧化锌 磷化锌 硫化锌 偏硅锌 FBXL21蛋白抗体IL-12R Beta1/CD212/FITC 荧光素标记白介素-12受体β1抗体IgG F-box蛋白家族FBXO7抗体IL-12R Beta2/FITC 荧光素标记白介素-12受体β2抗体IgG
PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 人博卡病毒PCR试剂盒 规格： 50次 货号：BH-P63668 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 鹅不食草（标准品）英文名称： 6-O-Benzylguanine(O6BG)JWA蛋白抗体包装100g
厄弗酚英文名称： Hypocrellin连接蛋白JPH3抗体包装25g
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儿茶(儿茶)（标准品）英文名称： Acemetacin组蛋白去基化酶JMJ2A抗体包装25g
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二苯基庚烷A（标准品）英文名称： Chlorpromazine HCl磷酸化γ连环蛋白抗体包装1g
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FBXL21蛋白抗体IL-12R Beta1/CD212/FITC 荧光素标记白介素-12受体β1抗体IgG
F-box蛋白家族FBXO7抗体IL-12R Beta2/FITC 荧光素标记白介素-12受体β2抗体IgG