产品参数:
产品名称: 流感病毒N8亚型检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P63708
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
麻枫树酚酮B(标准品)英文名称: rU Phosphoramidite肌肉特异性环指蛋白3抗体包装5g
(草)(标准品)英文名称: Bz-rA Phosphoramidite磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体包装1g
(中)(标准品)英文名称: i-bu-rG Phosphoramidite丝裂原活化蛋白激酶13抗体包装25g
根(标准品)英文名称: Dacomitinib多纤毛素蛋白抗体包装5g
麻醉椒苦素英文名称: Ac-rC Phosphoramidite肌管素相关蛋白8抗体包装100g
麻醉椒素英文名称: Tetrodotoxin巨噬甘露糖受体2抗体包装25g
马鞭草(标准品)英文名称: Tetrodotoxin周期G1的相互作用蛋白抗体包装5g
马勃(标准品)英文名称: Ac-dC Phosphoramidite主导控制样蛋白3抗体包装1g
马齿苋(标准品)英文名称: 2,2'-Anhydro-5-Me-U丝裂原活化蛋白激酶MKK3抗体包装5g
马兜铃(北马兜铃)(标准品)英文名称: 7-Deaza-7-I-2’-dGMYSM1抗体包装1g
马兜铃酸A(标准品)英文名称: 7-Deaza-7-I-2’-dA单羧酸转运蛋白-1抗体包装5g
马兜铃酸C英文名称: Dideoxyadenosine微管相关蛋白1A抗体包装10g
马兜铃酸D英文名称: Xylitol中期因子/肝素结合生长因子抗体包装50g
马兜铃酸II英文名称: Xylitol盐皮质受体抗体包装25g
马兰草(标准品)英文名称: 2',3'-Dideoxythymidine促黑α抗体包装5g
流感病毒N8亚型检测试剂盒(荧光PCR法)腺苷环化酶激活肽-27/38抗体10-去乙酰巴卡丁III 2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione
p19ARF抑癌因抗体10-氧多烯紫杉 9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedione
p21蛋白抗体13-O-(三乙硅)巴卡丁III 9-Bromophenanthrene
P2Y1受体抗体/嘌呤受体抗体13-{[(3-N-Boc)-2,2-二-4S-苯... 3-Bromophenanthrene
神经再生相关蛋白抗体13-{[(3-N-Boc)-2,2-二-4S-苯... 3,6-Dimethylphenanthrene
丝裂原活化蛋白激酶p38α抗体13-{[(3-t-Boc)-2,2-二-4S-苯... 3-Methylphenanthrene
促尿钠排泄肽前体C抗体13-{[(3-t-Boc)-2,2-二-4S-苯... 3-Bromo-1,10-phenanthroline
磷脂磷酶2C抗体13-{[(3-t-Boc)-2,2-二-4S-苯... 5-Chloro-1,10-phenanthroline
配对盒因1抗体13-顺式-酯视黄 2-Chloro-1,10-phenanthroline
磷酸化FRA-1蛋白抗体Phospho-IRAK1 (Thr209) /FITC 荧光素标记磷酸化白介素-1受体相关激酶1抗体IgG
磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体Phospho-IRAK1 (Thr387) /FITC 荧光素标记磷酸化白介素-1受体相关激酶1抗体IgG