PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数: 产品名称: 流感病毒H10亚型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63716 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结��; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 牛大力(美丽崖豆藤)(标准品)英文名称: Salvianolic acid B少突胶质髓鞘相关蛋白抗体包装5g 牛胆粉(标准品)英文名称: Salvianolic acid CCDC42结合蛋白激酶α抗体(MRCKα)包装1g 牛耳枫(标准品)英文名称: Salvianolic acid D髓样分化蛋白抗体包装5g 牛黄(标准品)英文名称: Cholesterol外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗体包装100g 牛磺鹅去氧胆酸(标准品)英文名称: Cholesterol褪黑素受体1A/松果体素受体1A抗体包装25g 牛膝(标准品)英文名称: Cholic acid肌**素抗体包装25g 牛至(标准品)英文名称: Cholic acid磷酸化髓鞘转录因子1抗体包装5g 扭肚藤(标准品)英文名称: LobetyolinDNA损伤关键蛋白Mre11抗体包装1g 女贞苷(标准品)英文名称: α-mangostin磷酸化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体包装5g 女贞子(标准品)英文名称: Diosimin蛋白激酶MST抗体包装1g 诺米林(标准品)英文名称: Diosimin磷酸化蛋白激酶MST抗体包装25g 糯稻根(标准品)英文名称: Momordin Ic磷酸化肌球蛋白轻链2抗体包装5g 欧当归内酯A(标准品)英文名称: Ziyuglycoside I髓鞘转录因子1抗体包装1g 欧夹竹桃苷(标准品)英文名称: Ziyuglycoside II髓样白血病-1抗体包装250mg 欧前胡素(标准品)英文名称: Eugenol微管相关蛋白2抗体包装5g 流感病毒H10亚型检测试剂盒(荧光PCR法)香草乙酯Human 香叶丁酯Human, Mouse 硝-γ-丁酯Human 硝正戊酯Human, Mouse, Rat 辛二二乙酯Human 新戊酯Human 溴醋酯Human, Mouse, Rat 溴化-3-羟-1-吡啶二氨酯Human, Rat 溴乙异酯Human, Mouse 磷酸化c-fos抗体phospho-IRS1(Ser612)/FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1抗体IgG 磷酸化c-fos抗体phospho-IRS1(Ser636/639) /FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1抗体IgG
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数: 产品名称: 流感病毒H10亚型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63716 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结��; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 牛大力(美丽崖豆藤)(标准品)英文名称: Salvianolic acid B少突胶质髓鞘相关蛋白抗体包装5g
牛胆粉(标准品)英文名称: Salvianolic acid CCDC42结合蛋白激酶α抗体(MRCKα)包装1g
牛耳枫(标准品)英文名称: Salvianolic acid D髓样分化蛋白抗体包装5g
牛黄(标准品)英文名称: Cholesterol外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗体包装100g
牛磺鹅去氧胆酸(标准品)英文名称: Cholesterol褪黑素受体1A/松果体素受体1A抗体包装25g
牛膝(标准品)英文名称: Cholic acid肌**素抗体包装25g
牛至(标准品)英文名称: Cholic acid磷酸化髓鞘转录因子1抗体包装5g
扭肚藤(标准品)英文名称: LobetyolinDNA损伤关键蛋白Mre11抗体包装1g
女贞苷(标准品)英文名称: α-mangostin磷酸化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体包装5g
女贞子(标准品)英文名称: Diosimin蛋白激酶MST抗体包装1g
诺米林(标准品)英文名称: Diosimin磷酸化蛋白激酶MST抗体包装25g
糯稻根(标准品)英文名称: Momordin Ic磷酸化肌球蛋白轻链2抗体包装5g
欧当归内酯A(标准品)英文名称: Ziyuglycoside I髓鞘转录因子1抗体包装1g
欧夹竹桃苷(标准品)英文名称: Ziyuglycoside II髓样白血病-1抗体包装250mg
欧前胡素(标准品)英文名称: Eugenol微管相关蛋白2抗体包装5g 流感病毒H10亚型检测试剂盒(荧光PCR法)香草乙酯Human
香叶丁酯Human, Mouse
硝-γ-丁酯Human
硝正戊酯Human, Mouse, Rat
辛二二乙酯Human
新戊酯Human
溴醋酯Human, Mouse, Rat
溴化-3-羟-1-吡啶二氨酯Human, Rat
溴乙异酯Human, Mouse
磷酸化c-fos抗体phospho-IRS1(Ser612)/FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1抗体IgG
磷酸化c-fos抗体phospho-IRS1(Ser636/639) /FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1抗体IgG