PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数: 产品名称: 流感病毒H12亚型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63718 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 蒲黄(标准品)英文名称: Anthraquinone线粒体铁转运蛋白1抗体包装500g 蒲葵子(标准品)英文名称: Cynarin磷酸化原癌基因c-Met抗体包装100g 七叶胆苷XVII(标准品)英文名称: 1,5-Dicaffeoylquinic acid磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体包装25g 七叶皂苷A英文名称: Dihydrotanshinone I甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶1抗体包装500g 七叶皂苷B英文名称: Columbianadin胃动素受体抗体包装100g 七叶皂苷C英文名称: Dihydromyricetin特异性MLT5蛋白抗体包装25g 七叶皂苷钠(标准品)英文名称: Dihydromyricetin软骨基质蛋白抗体包装5g 桤木酮英文名称: Sennoside A丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体包装1g 漆姑草(标准品)英文名称: Sennoside B甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2抗体包装5g 漆黄素(标准品)英文名称: Fangchinoline微小染色体维持缺陷蛋白2抗体包装1g 齐墩果酸(标准品)英文名称: Tetrandrine微小染色体维持缺陷蛋白3抗体包装5g 齐墩果酸-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠...英文名称: 5-Methoxypsoralen基质金属蛋白酶-26抗体包装1g 齐墩果酮酸英文名称: Glycyrrhetinic acid丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体包装25g 奇任(标准品)英文名称: LiquiritinMYOZ抗体包装5g 蕲蛇(标准品)英文名称: Liquiritigenin单核趋化蛋白2抗体包装100g 流感病毒H12亚型检测试剂盒(荧光PCR法)硝低汞 溴化高汞 乙化汞 乙亚汞 (2-羟乙)三溴化铵 2-羟-1-萘化铵 氨磺铵 苯三化铵 吡咯烷二硫代氨铵 肺鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体(N端)IRS-3/FITC 荧光素标记胰岛素受体底物-3抗体IgG 补体因子H抗体IRS-4/FITC 荧光素标记胰岛素受体底物-4抗体IgG
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数: 产品名称: 流感病毒H12亚型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63718 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 蒲黄(标准品)英文名称: Anthraquinone线粒体铁转运蛋白1抗体包装500g
蒲葵子(标准品)英文名称: Cynarin磷酸化原癌基因c-Met抗体包装100g
七叶胆苷XVII(标准品)英文名称: 1,5-Dicaffeoylquinic acid磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体包装25g
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齐墩果酮酸英文名称: Glycyrrhetinic acid丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体包装25g
奇任(标准品)英文名称: LiquiritinMYOZ抗体包装5g
蕲蛇(标准品)英文名称: Liquiritigenin单核趋化蛋白2抗体包装100g 流感病毒H12亚型检测试剂盒(荧光PCR法)硝低汞
溴化高汞
乙化汞
乙亚汞
(2-羟乙)三溴化铵
2-羟-1-萘化铵
氨磺铵
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吡咯烷二硫代氨铵
肺鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体(N端)IRS-3/FITC 荧光素标记胰岛素受体底物-3抗体IgG
补体因子H抗体IRS-4/FITC 荧光素标记胰岛素受体底物-4抗体IgG