产品参数:
产品名称: 呼吸道合胞病毒A型检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P63764
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的���度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
银杏酸C13:0,白果酸C13:0英文名称: Epigomisin O脂质运载蛋白抗体包装25ml
银杏酸C15:1英文名称: Hydrocortisone sodium succinate2型神经纤维瘤抗体包装5ml
银杏叶(标准品)英文名称: Aniracetam膜相关磷脂转运蛋白抗体包装5mg
隐丹参酮(标准品)英文名称: Carbazochrome sodium sulfonate纳曲酮抗体IgG包装25g
隐绿原酸(标准品)英文名称: Carbazochrome sodium sulfonate磷酸化分化相关基因NDRG1抗体包装5g
印度榅桲甙英文名称: D-Calcium Panthotenate 磷酸化分化相关基因NDRG1抗体包装1g
印度獐芽菜(标准品)英文名称: Terazosin HCl泛素连接酶NEDD4-2抗体包装250mg
壳(标准品)英文名称: Sodium chloride磷酸化2型神经纤维瘤抗体包装5g
樱黄素(标准品)英文名称: Amrinone磷酸化谷氨酸受体1抗体包装1g
鹰嘴豆芽素A(标准品)英文名称: Ganciclovir磷酸化谷氨酸受体1抗体包装1g
硬飞燕草碱(标准品)英文名称: Carbazochrome神经束蛋白186抗体包装5g
油菜花粉(标准品)英文名称: Piracetam磷酸化泛素连接酶NEDD4-2抗体包装25g
柚皮苷(标准品)英文名称: Furazabol磷酸化核因子p50/k基因结合核因子抗体包装5g
柚皮苷二氢查尔酮英文名称: 2-Ethoxybenzamide磷酸化谷氨酸受体1抗体包装250mg
柚皮苷二氢查尔酮(标准品)英文名称: Citric acid monohydrate类固受体激活蛋白2抗体包装100ml
呼吸道合胞病毒A型检测试剂盒(荧光PCR法)小鼠绒毛膜促性腺**β盐小檗(标准品)Human, Mouse, Rat
人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子盐药根(标准品)Human, Rat
人色素上皮衍生因子盐伊立替康(标准品)Human, Mouse
小鼠性**结合球蛋白盐益母草(标准品)Human
人白介素23盐育亨宾(标准品)Human
小鼠脱氢表雄S7羊胆粉(标准品)Human, Mouse, Rat
人克拉拉蛋白羊耳菊(标准品)Human, Mouse, Rat
大鼠心肌营养素1羊开口(标准品)Human, Mouse, Rat
大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA羊奶奶叶(标准品)Human
肾母瘤X蛋白抗体Laminin alpha5/FITC 荧光素标记层粘蛋白α5抗体IgG
α-L岩藻糖苷酶抗体LAG-3/CD223/FITC 荧光素标记**活化因-3抗体IgG