产品参数:
产品名称: 绿脓杆菌检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P63792
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
富马酸喹硫平英文名称: β-Amyloid (25-35)神经母瘤蛋白PHOX2B抗体包装100g
富马酸卢帕他定英文名称: β-MSH, human周期蛋白依赖性激酶5激活因子1抗体包装25g
富马酸马斯汀英文名称: β-MSH, monkey肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基5抗体包装1g
富马酸酮替芬英文名称: Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)浦肯野相关蛋白1抗体包装5g
富马酸伊布利特英文名称: Ac-YVAD-pNA凋亡诱导受体PLEKHG5抗体包装500g
枸橼酸莫沙比利英文名称: ACTH (1-10), human蛋白质磷酸酶2A-B55抗体包装100mg
枸橼酸喷托维林/托可拉斯/妥克拉司英文名称: ACTH (1-13), human棕榈酰蛋白解酶2抗体包装1g
枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君英文名称: ACTH (1-16), human多谷氨酰结合蛋白1抗体包装250mg
骨化二英文名称: ACTH (1-17), human猪蓝耳病病抗体包装1g
骨化三英文名称: ACTH (1-24), human对氧磷酶3抗体包装25g
琥珀酸多西拉敏英文名称: ACTH(1-39),human蛋白质精氨酸亚型2抗体包装5g
琥珀酸舒马曲普坦英文名称: ACTH (1-39), rat磷酸乙转移酶2抗体包装10ml
华法林英文名称: ACTH (18-39), human磷脂酰肌结合网格蛋白组装蛋白抗体包装50ml
华法林钠英文名称: ACTH (4-10), human丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶1调节亚基10抗体包装1g
环苯扎林盐酸盐英文名称: Adrenomedullin (22-52),human色素氧化酶装配因子PET112抗体包装25g
绿脓杆菌检测试剂盒(荧光PCR法)锌指蛋白516抗体6-羟-7-氧-4-苯(黄檀素) DALBERGIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
锌指蛋白750抗体豆苷 DAIDZIN(RG)Human, Mouse, Rat
锌指蛋白744抗体豆苷 DAIDZIN(RG)Human, Mouse, Rat
锌转运体8蛋白抗体豆苷 DAIDZIN(RG)Human
锌指蛋白852抗体豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse, Rat
锌指蛋白503抗体DEACETYL-7-XYLOSYLCEPHALOMANNINE, 10-(RG)Human, Mouse, Rat
锌指蛋白672抗体7-木糖甙-10-脱乙酰紫杉 DEACETYL-7-XYLOTAXOL, 10-(P)Human, Mouse
锌指蛋白198抗体7-木糖甙-10-脱乙酰紫杉 DEACETYL-7-XYLOTAXOL, 10-(P)Human, Mouse, Rat
锌指蛋白323抗体10-去乙酰紫杉 DEACETYLTAXOL, 10-(P)Human, Rat
G蛋白偶联受体GPR10蛋白抗体LIMK1 /FITC 荧光素标记单丝氨酸蛋白激酶1抗体IgG
G蛋白偶联受体C5L2蛋白抗体Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC 荧光素标记磷酸化单丝氨酸蛋白激酶1/2抗体IgG