产品参数:
产品名称: 粗球孢子菌检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P63800
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
葡聚糖D20/右旋糖苷英文名称: Phospholipase A2 ActivatingPeptide蛋白酪氨酸磷酸酶-1B抗体包装1g
普拉克索碱英文名称: PhysalaeminCyclin A1相互作用蛋白抗体包装5g
普拉洛芬英文名称: PKI-tide野生型P53诱导基因1单克隆抗体包装1g
普仑司特英文名称: Plaet Factor 4 (58-70)(human)多囊肾蛋白1抗体包装1g
普瑞巴林英文名称: Pneumadin (human)多囊肾蛋白2抗体包装250mg
齐多夫定英文名称: Pneumadin (rat)凋亡相关蛋白4抗体包装2ml
齐留通英文名称: Prion Peptide (106-126),Human磷脂酰肌激酶催化亚单位D抗体包装25g
羟苯磺酸钙英文名称: Proadrenomedullin (1-20)(human)血小板源性生长因子受体β样蛋白抗体包装5g
氢化奎宁定;双氢奎尼丁英文名称: Proadrenomedullin (45-92)(human)磷酸化磷酯酶Cβ3抗体包装25ml
氢槟榔碱(进口)英文名称: Protein Kinase C (19-31)磷酸化蛋白激酶样内质网激酶抗体包装5ml
氢槟榔碱; 槟榔碱氢盐(国产)英文名称: Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein6磷酸果糖激酶2抗体包装100g
氢达非那新英文名称: Protein Kinase C (530-558)磷酸化6磷酸果糖激酶2抗体包装1g
氢后马托品英文名称: pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)磷酸化磷脂酰肌激酶抗体包装25g
氢加兰他敏英文名称: pTH (13-34) (human)磷酸化蛋白激酶C α/β2抗体包装5g
氢右美沙芬英文名称: pTH (3-34) (bovine)蛋白激酶C α抗体包装100g
粗球孢子菌检测试剂盒(荧光PCR法)新型金属质蛋白酶(抗原)月桂(标准品)Human
脂联素受体-1(抗原)孕三烯(标准品)Human
脂联素受体-2(抗原)扎隆(标准品)Human, Mouse, Rat
前列腺性磷酶抗原扎那米韦(标准品)Human
前列腺性磷酶抗原(人)扎托布洛芬(标准品)Human, Mouse, Rat
P选择素抗原正己(标准品)Human, Mouse
溶酶体膜糖蛋白抗原正十九烷(标准品)Human, Mouse
一种肿瘤抑制因抗原(C端)正十五烷(标准品)Human, Mouse
微白蛋白/细小清蛋白抗原芝麻酚(标准品)Human, Mouse
磷酸化接头蛋白Gab2抗体HRH4/GPCR105/FITC 荧光素标记组织H4受体抗体IgG
干扰素/维酸诱导凋亡相关因抗体LOX-1/OLR1/FITC 荧光素标记凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体抗体IgG