使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 脑膜炎奈瑟菌血清群W135检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P63810
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的��度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
盐酸伊托必利英文名称: Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides蛋白磷酸酶2Cα抗体包装25g
盐酸依普拉酮英文名称: Sulfamethazine sodium salt磷酸化桩蛋白Paxillin抗体包装5g
盐酸乙哌立松英文名称: Sulfobromophthalein disodium salt hydrate神经胞浆蛋白9.5抗体(蛋白基因产物9.5)包装1g
盐酸异英文名称: Sulfo-MBS磷酸化蛋白激酶Aβ抗体包装25g
盐酸异肾上腺素(进口)英文名称: Tetraheptylammonium bromide蛋白激酶A受体2α亚基抗体包装5g
盐酸异肾上腺素(国产)英文名称: Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution磷酸化蛋白激酶A受体2α亚基抗体包装1g
盐酸右美托咪定英文名称: Thapsigargin, from Thapsia garganica蛋白激酶Aγ抗体包装5g
盐酸左西替利英文名称: Thioflavin T蛋白激酶受体相关1β抗体包装1g
盐酸咪唑英文名称: Thiolutin from Streptomyces luteosporeusB诱导成熟蛋白1抗体包装250mg
叶绿素铜钠盐英文名称: Thionin磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗体包装5g
伊班膦酸钠英文名称: Thiosalicylic acid蛋白激酶A调节亚基a1抗体包装100g
伊潘立酮英文名称: Thiostrepton from Streptomyces azureus磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗体包装25g
伊屈泼帕;艾曲波帕英文名称: ThorinPDZ结构域PDZK5A蛋白抗体包装500g
伊索拉定英文名称: Thymine磷酸脂磷酸解酶1抗体包装5g
依达拉奉英文名称: Timentin抑癌基因p16/p14/P19抗体包装1g
脑膜炎奈瑟菌血清群W135检测试剂盒(荧光PCR法)性核蛋白1/锌指蛋白basonuclin抗体白细胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)检测试剂盒IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit
癌膜蛋白11抗体(前梯度同源蛋白2)白细胞介素1α(IL-1α)检测试剂盒IL-1α ELISA Kit
人脑钠素单克隆抗体白细胞介素17(IL-17)检测试剂盒IL-17 ELISA Kit
B**成熟因子抗体白细胞介素16(IL-16)检测试剂盒IL-16 ELISA Kit
促凋亡Bik蛋白抗体白细胞介素13(IL-13)检测试剂盒IL-13 ELISA Kit
癌抑癌蛋白抗体白细胞介素12(IL-12/P70)检测试剂盒IL-12/P70 ELISA Kit
癌易感因环状结构域蛋白抗体白细胞介素12(IL-12/P40)检测试剂盒IL-12/P40 ELISA Kit
癌相关抗原BRCAA1抗体白细胞介素10(IL-10)检测试剂盒IL-10 ELISA Kit
脑组织表达X连锁蛋白1抗体白细胞分化抗原配体40(CD40/TNFRSF5)检测试剂盒CD40/TNFRSF5 ELISA Kit
Rab5激活蛋白6抗体ATEXPA10 /FITC 荧光素标记 植物延长蛋白(拟南芥)IgG
NuBI蛋白结合蛋白1抗体Ly-6G/FITC 荧光素标记**抗原6G抗体IgG
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。