PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 肠道病毒70型检测试剂盒（荧光PCR法） 规格： 50T 货号：BH-P63828 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 胎盘蛋白14抗体包装5g 磷酸激酶α1抗体包装1g 磷酸化酶激酶γ1包装25g 亲环素相关蛋白1抗体包装5g 磷酸化酶激酶γ2包装1g 肝糖原磷酸化酶抗体包装5g 肌肉糖原磷酸化酶抗体包装25g 磷酸羧化酶2抗体包装5g 磷酸葡萄糖酸内酯酶抗体包装25ml 蛋白磷酸酶2C亚型α抗体包装5ml 蛋白激酶C nu型抗体包装1g 磷酸化蛋白激酶C nu型抗体包装25g 磷酸化磷脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体包装5g 磷酸甘油酸脱氢酶抗体包装25g 磷酸化泌乳素抗体包装5g 肠道病毒70型检测试剂盒（荧光PCR法）血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷Human, Mouse 信号通路Wnt1抗原6,7,4'-三羟异黄Human 包含氧化还原酶的WW域抗原6-氧二氢血根Human, Rat X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗原6-氧山柰酚-3-O-芸香糖苷Human, Mouse XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗原6-姜酚(姜辣素)Human, Mouse X射线修复交叉互补蛋白/切除修复因抗原6-姜烯酚（标准品）Human 胞质紧密粘连蛋白1抗原6-羟(标准品)Human, Mouse ARC(多肽抗原)6-异麦冬黄烷A(标准品)Human, Mouse 血管紧张素Ⅱ受体(抗原)7,4'-二羟黄（标准品）Human, Mouse, Rat 半乳糖脑苷脂酶抗体Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体IgG G蛋白偶联受体激酶5抗体p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体IgG
PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数： 产品名称： 肠道病毒70型检测试剂盒（荧光PCR法） 规格： 50T 货号：BH-P63828 公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用及效果： 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则： ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 胎盘蛋白14抗体包装5g
磷酸激酶α1抗体包装1g
磷酸化酶激酶γ1包装25g
亲环素相关蛋白1抗体包装5g
磷酸化酶激酶γ2包装1g
肝糖原磷酸化酶抗体包装5g
肌肉糖原磷酸化酶抗体包装25g
磷酸羧化酶2抗体包装5g
磷酸葡萄糖酸内酯酶抗体包装25ml
蛋白磷酸酶2C亚型α抗体包装5ml
蛋白激酶C nu型抗体包装1g
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磷酸化磷脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体包装5g
磷酸甘油酸脱氢酶抗体包装25g
磷酸化泌乳素抗体包装5g 肠道病毒70型检测试剂盒（荧光PCR法）血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷Human, Mouse
信号通路Wnt1抗原6,7,4'-三羟异黄Human
包含氧化还原酶的WW域抗原6-氧二氢血根Human, Rat
X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗原6-氧山柰酚-3-O-芸香糖苷Human, Mouse
XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗原6-姜酚(姜辣素)Human, Mouse
X射线修复交叉互补蛋白/切除修复因抗原6-姜烯酚（标准品）Human
胞质紧密粘连蛋白1抗原6-羟(标准品)Human, Mouse
ARC(多肽抗原)6-异麦冬黄烷A(标准品)Human, Mouse
血管紧张素Ⅱ受体(抗原)7,4'-二羟黄（标准品）Human, Mouse, Rat
半乳糖脑苷脂酶抗体Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体IgG
G蛋白偶联受体激酶5抗体p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体IgG