使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 柯萨奇病毒A16型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63830 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通��选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 PCID2蛋白抗体包装5ml 腺苷酸硫酸激酶1抗体包装5g 腺苷酸硫酸激酶2抗体包装25g 蛋白酶激活受体3抗体包装5g MAWD结合蛋白抗体包装100g PCID1蛋白抗体包装25g PDZ结构域PDZK6蛋白抗体包装500g 吡哆激酶抗体包装25g PDZ结构域PDZK1蛋白抗体包装5g 前列腺癌激活蛋白抗体包装100g PDZ结构域PDZK4蛋白抗体包装25g PDZ结构域PDZK7蛋白抗体包装5g PDZ结构域PDZK8蛋白抗体包装1g 磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗体包装5g 过氧化还原酶5/6抗体包装100g 柯萨奇病毒A16型检测试剂盒(荧光PCR法)血管紧张素Ⅱ-1型受体抗原苯灵(标准品)Human, Mouse NFkB诱导的激酶(抗原)波必利(标准品)Human, Mouse 活化复制因子1氮平(标准品)Human, Mouse 神经肽S羟喹(标准品)Human, Mouse 神经激肽B(抗原)羟喹系统适用性试验对照品Human, Mouse, Rat 活化复制因子2(多肽)法齐明(标准品)Human 磷化活化复制因子2抗原化胆(标准品)Human 神经激肽-B受体(抗原)化琥珀酰胆(标准品)Human, Mouse 活化转录因子3抗原化(标准品)Human, Mouse, Rat 生长分化因子7抗体MARCO/FITC 荧光素标记巨噬清道夫受体抗体IgG 葡萄糖激酶调节蛋白抗体MASP/FITC 荧光素标记抗MBL相关丝氨酸蛋白酶抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 柯萨奇病毒A16型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63830 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通��选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 PCID2蛋白抗体包装5ml
腺苷酸硫酸激酶1抗体包装5g
腺苷酸硫酸激酶2抗体包装25g
蛋白酶激活受体3抗体包装5g
MAWD结合蛋白抗体包装100g
PCID1蛋白抗体包装25g
PDZ结构域PDZK6蛋白抗体包装500g
吡哆激酶抗体包装25g
PDZ结构域PDZK1蛋白抗体包装5g
前列腺癌激活蛋白抗体包装100g
PDZ结构域PDZK4蛋白抗体包装25g
PDZ结构域PDZK7蛋白抗体包装5g
PDZ结构域PDZK8蛋白抗体包装1g
磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗体包装5g
过氧化还原酶5/6抗体包装100g 柯萨奇病毒A16型检测试剂盒(荧光PCR法)血管紧张素Ⅱ-1型受体抗原苯灵(标准品)Human, Mouse
NFkB诱导的激酶(抗原)波必利(标准品)Human, Mouse
活化复制因子1氮平(标准品)Human, Mouse
神经肽S羟喹(标准品)Human, Mouse
神经激肽B(抗原)羟喹系统适用性试验对照品Human, Mouse, Rat
活化复制因子2(多肽)法齐明(标准品)Human
磷化活化复制因子2抗原化胆(标准品)Human
神经激肽-B受体(抗原)化琥珀酰胆(标准品)Human, Mouse
活化转录因子3抗原化(标准品)Human, Mouse, Rat
生长分化因子7抗体MARCO/FITC 荧光素标记巨噬清道夫受体抗体IgG
葡萄糖激酶调节蛋白抗体MASP/FITC 荧光素标记抗MBL相关丝氨酸蛋白酶抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。