使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 柯萨奇病毒A6型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63832 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚��酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 脯氨酸脱氢酶抗体包装1g 蛋白酶调解因子8抗体包装250mg 蛋白C抑制因子抗体包装1g 原钙粘蛋白γB5抗体包装25g 蛋白酶体PSMα5抗体包装5g 含patatin样磷脂酶6抗体包装1g 神经丛蛋白A4抗体包装5g 多形性腺瘤基因样蛋白2抗体包装100g 表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体包装25g 磷酸化心脏磷蛋白抗体包装500g 磷酸化心脏磷蛋白抗体包装100ml 蛋白酪氨酸磷酸酶样N前体蛋白抗体包装500ml 26S蛋白酶调节亚型p55抗体包装100g 过氧化物酶肌氨酸氧化酶抗体包装25g prox-1抗体包装5g 柯萨奇病毒A6型检测试剂盒(荧光PCR法)血管**素相关蛋白5补体蛋白3(C3)检测试剂盒C3 ELISA Kit 锚蛋白重复域53抗体补体C4(C4)检测试剂盒C4 ELISA Kit 锚蛋白重复域54抗体补体1抑制物抗体(C1INH)检测试剂盒C1INH ELISA Kit ATP合成酶β5抗体波形蛋白(VIM)检测试剂盒VIM ELISA Kit 肌侧索硬化症相关蛋白3抗体丙脱氢酶E1(PDH E1)检测试剂盒PDH E1 ELISA Kit 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体丙激酶M2型同工酶(M2-PK)检测试剂盒M2-PK ELISA Kit 肌侧索硬化症相关蛋白1抗体丙激酶(PK)检测试剂盒PK ELISA Kit β淀粉样前体蛋白结合蛋白2抗体(X11β)丙二单酰辅酶A(malonyl CoA)检测试剂盒malonyl CoA ELISA Kit 乙酰辅酶A结合蛋白抗体丙二醛(MDA)检测试剂盒MDA ELISA Kit 葡萄糖果糖还原酶2抗体MATH1/FITC 荧光素标记肠道分化干MATH-1蛋白抗体IgG 胶质系源性神经营养因子受体α1样蛋白抗体Matrilin 1/CMP/FITC 荧光素标记软骨质蛋白抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 柯萨奇病毒A6型检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63832 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚��酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 脯氨酸脱氢酶抗体包装1g
蛋白酶调解因子8抗体包装250mg
蛋白C抑制因子抗体包装1g
原钙粘蛋白γB5抗体包装25g
蛋白酶体PSMα5抗体包装5g
含patatin样磷脂酶6抗体包装1g
神经丛蛋白A4抗体包装5g
多形性腺瘤基因样蛋白2抗体包装100g
表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体包装25g
磷酸化心脏磷蛋白抗体包装500g
磷酸化心脏磷蛋白抗体包装100ml
蛋白酪氨酸磷酸酶样N前体蛋白抗体包装500ml
26S蛋白酶调节亚型p55抗体包装100g
过氧化物酶肌氨酸氧化酶抗体包装25g
prox-1抗体包装5g 柯萨奇病毒A6型检测试剂盒(荧光PCR法)血管**素相关蛋白5补体蛋白3(C3)检测试剂盒C3 ELISA Kit
锚蛋白重复域53抗体补体C4(C4)检测试剂盒C4 ELISA Kit
锚蛋白重复域54抗体补体1抑制物抗体(C1INH)检测试剂盒C1INH ELISA Kit
ATP合成酶β5抗体波形蛋白(VIM)检测试剂盒VIM ELISA Kit
肌侧索硬化症相关蛋白3抗体丙脱氢酶E1(PDH E1)检测试剂盒PDH E1 ELISA Kit
腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体丙激酶M2型同工酶(M2-PK)检测试剂盒M2-PK ELISA Kit
肌侧索硬化症相关蛋白1抗体丙激酶(PK)检测试剂盒PK ELISA Kit
β淀粉样前体蛋白结合蛋白2抗体(X11β)丙二单酰辅酶A(malonyl CoA)检测试剂盒malonyl CoA ELISA Kit
乙酰辅酶A结合蛋白抗体丙二醛(MDA)检测试剂盒MDA ELISA Kit
葡萄糖果糖还原酶2抗体MATH1/FITC 荧光素标记肠道分化干MATH-1蛋白抗体IgG
胶质系源性神经营养因子受体α1样蛋白抗体Matrilin 1/CMP/FITC 荧光素标记软骨质蛋白抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。