公司产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称
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柯萨奇病毒B4检测试剂盒(荧光PCR法)
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规格
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50T
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货号
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BH-P63839
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组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
肿瘤抑制基因p53抗体包装100g
蛋白酶激活受体4抗体包装25g
原钙粘蛋白β5抗体包装500g
凋亡相关蛋白7抗体包装100g
调亡诱导因子家族蛋白PEF1抗体包装25g
脂滴包被蛋白A+B抗体包装5g
调亡诱导因子6相互作用蛋白/多巴受体相互作用蛋白4抗体包装5g
小鼠抗莱克多巴单克隆抗体包装10MG
PDZ结构域PDZK9蛋白抗体包装100g
嘌呤受体P2X7抗体包装25g
三磷酸腺苷受体受体P2X1抗体包装1g
三磷酸腺苷受体P2X5抗体包装250mg
三磷酸腺苷受体P2X5b抗体包装5g
三磷酸腺苷受体P2X6抗体包装25g
突触富含脯氨酸膜蛋白7抗体包装5g
柯萨奇病毒B4检测试剂盒(荧光PCR法)血蓝蛋白臭梧桐叶(标准品)Human, Mouse
Ki-67川贝母(标准品)Human, Mouse
脂质运载蛋白川陈皮素(标准品)Human, Mouse, Rat
瘦素川灯心草(标准品)Human, Mouse
硝唑偶联牛血清白蛋白川楝素(标准品)Human, Mouse
与血蓝蛋白偶联物川楝子(标准品)Human, Mouse
重组髓鞘少树突胶质糖蛋白1-125川麦冬苷AHuman, Mouse
双微体2癌因抗原川木通(标准品)Human
硝唑偶联鸡卵白蛋白川木香(标准品)Human, Mouse
谷氨酸受体红藻氨酸离子2/3抗体MCP-3/CCL7/FITC 荧光素标记单核趋化蛋白3抗体(人)IgG
离子型谷氨酸受体4抗体MCP-3/CCL7/FITC 荧光素标记单核趋化蛋白3抗体(大、小鼠)IgG
公司即用型PCR试剂盒:
是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。