使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 创伤弧菌检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63896 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 突触结合蛋白14抗体 TATA结合蛋白TBP抗体 微管蛋白特定伴侣蛋白E抗体 Tudor结构域蛋白TDRD3抗体 线粒体内膜转位酶8A/耳聋/肌张力障碍肽抗体 跨膜蛋白158抗体 Tau微管蛋白激酶2抗体 谷氨酰转酶6抗体 跨膜蛋白59样蛋白抗体 共济失调蛋白8抗体 TBR1蛋白抗体 感光转录因子TULP3抗体 TSK蛋白抗体 味觉受体蛋白家族2亚基5抗体 微管蛋白聚合促进蛋白24 创伤弧菌检测试剂盒(荧光PCR法)一氧化氮合酶转运诱导抗体异水飞蓟宾 alpha-Asarone 中性鞘磷脂相关因子抗体异土木香内酯(标准品) Dioxopromethazine hydrochloride 人白介素3介导核因子抗体异夏佛塔苷(标准品) Ganoderal A SH2结构域蛋白3A抗体异型南五味子丁素(标准品) Astemizole 转化神经突起蛋白抗体异樱花素;异樱花亭(标准品) Eltrombopag (SB-497115) NPIP样蛋白1抗体异泽兰黄素(标准品) Capsazepine 老年性痴呆蛋白APH2抗体异紫花前胡内酯 Amiloride hydrochloride 神经凋亡调节转化蛋白1抗体(前蛋白转化酶枯草溶菌素9)益母草(标准品) Amiloride hydrochloride G蛋白偶联受体147抗体益智(益智仁)(标准品) Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate 配子**素抗体Phospho-MSK1 (Thr581) /FITC 荧光素标记磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG γ谷氨酰转肽酶2重链抗体MSLN /FITC 荧光素标记间皮素抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 创伤弧菌检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63896 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 突触结合蛋白14抗体
TATA结合蛋白TBP抗体
微管蛋白特定伴侣蛋白E抗体
Tudor结构域蛋白TDRD3抗体
线粒体内膜转位酶8A/耳聋/肌张力障碍肽抗体
跨膜蛋白158抗体
Tau微管蛋白激酶2抗体
谷氨酰转酶6抗体
跨膜蛋白59样蛋白抗体
共济失调蛋白8抗体
TBR1蛋白抗体
感光转录因子TULP3抗体
TSK蛋白抗体
味觉受体蛋白家族2亚基5抗体
微管蛋白聚合促进蛋白24 创伤弧菌检测试剂盒(荧光PCR法)一氧化氮合酶转运诱导抗体异水飞蓟宾 alpha-Asarone
中性鞘磷脂相关因子抗体异土木香内酯(标准品) Dioxopromethazine hydrochloride
人白介素3介导核因子抗体异夏佛塔苷(标准品) Ganoderal A
SH2结构域蛋白3A抗体异型南五味子丁素(标准品) Astemizole
转化神经突起蛋白抗体异樱花素;异樱花亭(标准品) Eltrombopag (SB-497115)
NPIP样蛋白1抗体异泽兰黄素(标准品) Capsazepine
老年性痴呆蛋白APH2抗体异紫花前胡内酯 Amiloride hydrochloride
神经凋亡调节转化蛋白1抗体(前蛋白转化酶枯草溶菌素9)益母草(标准品) Amiloride hydrochloride
G蛋白偶联受体147抗体益智(益智仁)(标准品) Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate
配子**素抗体Phospho-MSK1 (Thr581) /FITC 荧光素标记磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG
γ谷氨酰转肽酶2重链抗体MSLN /FITC 荧光素标记间皮素抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。