PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数: 产品名称: 类志贺邻单胞菌检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63898 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 三狀腺素T3抗体 肿瘤坏死因子配体超家族成员12A抗体 促状腺素受体抗体(N端) 状腺核转录因子-1抗体 转钴素蛋白2抗体 跨膜蛋白74抗体 转铁蛋白受体2抗体 肿瘤坏死因子受体超家族成员13B抗体 Toll样受体8抗体 胸腺素抗体 α微管蛋白乙酰转移酶1抗体 TANC1蛋白抗体 遗传性耳聋β-tectorin抗体 谷氨酰转酶2抗体 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶TNN13K抗体 类志贺邻单胞菌检测试剂盒(荧光PCR法)一种新发现的抑癌因(抗原)白头翁皂苷E-2Human, Mouse, Rat RRAD(多肽抗原)白头翁皂苷E-3Human 质衍生因子-1(抗原)白土苓(短柱肖菝契)(标准品)Human, Mouse shank1多肽抗原白土苓(华南肖菝葜)(标准品)Human, Mouse 溶质转运蛋白家族22成员17(多肽抗原)白薇(标准品)Human 可溶性载质转运蛋白SLC24A5(抗原)白鲜(标准品)Human, Mouse, Rat 溶质携带物家族-1(抗原)白鲜皮(标准品)Human 依赖钠钙交换蛋白6(抗原)白杨素(标准品)Human, Mouse 凋亡抑制因子的一种(抗原)白杨素-7-O-龙胆二糖苷Human, Mouse 磷酸化GATA结合蛋白3抗体MT/FITC 荧光素标记金属硫蛋白抗体IgG 延伸因子G2抗体MTA1/FITC 荧光素标记肿瘤转移相关蛋白1抗体IgG
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 产品参数: 产品名称: 类志贺邻单胞菌检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63898 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 三狀腺素T3抗体
肿瘤坏死因子配体超家族成员12A抗体
促状腺素受体抗体(N端)
状腺核转录因子-1抗体
转钴素蛋白2抗体
跨膜蛋白74抗体
转铁蛋白受体2抗体
肿瘤坏死因子受体超家族成员13B抗体
Toll样受体8抗体
胸腺素抗体
α微管蛋白乙酰转移酶1抗体
TANC1蛋白抗体
遗传性耳聋β-tectorin抗体
谷氨酰转酶2抗体
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶TNN13K抗体 类志贺邻单胞菌检测试剂盒(荧光PCR法)一种新发现的抑癌因(抗原)白头翁皂苷E-2Human, Mouse, Rat
RRAD(多肽抗原)白头翁皂苷E-3Human
质衍生因子-1(抗原)白土苓(短柱肖菝契)(标准品)Human, Mouse
shank1多肽抗原白土苓(华南肖菝葜)(标准品)Human, Mouse
溶质转运蛋白家族22成员17(多肽抗原)白薇(标准品)Human
可溶性载质转运蛋白SLC24A5(抗原)白鲜(标准品)Human, Mouse, Rat
溶质携带物家族-1(抗原)白鲜皮(标准品)Human
依赖钠钙交换蛋白6(抗原)白杨素(标准品)Human, Mouse
凋亡抑制因子的一种(抗原)白杨素-7-O-龙胆二糖苷Human, Mouse
磷酸化GATA结合蛋白3抗体MT/FITC 荧光素标记金属硫蛋白抗体IgG
延伸因子G2抗体MTA1/FITC 荧光素标记肿瘤转移相关蛋白1抗体IgG