使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 肠出血性大肠杆菌O104检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63909 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性��大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 端粒酶相关蛋白1抗体 谷氨酰转酶3抗体 环指蛋白92抗体 环指蛋白调节蛋白激酶C蛋白抗体 TRIM50蛋白抗体 环指蛋白88抗体 锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体 环指蛋白98抗体 环指蛋白16抗体 环指蛋白105抗体 环指蛋白125抗体 凝血酶(凝血因子II)重链抗体 转移生长因子β受体3抗体(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ) 辣椒素受体抗体 肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体 肠出血性大肠杆菌O104检测试剂盒(荧光PCR法)胰羧肽酶B1抗体亮氨丰富重复LGI家族成员3(LGI3)检测试剂盒LGI3 ELISA Kit 维结合蛋白2抗体亮氨丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒LRG1 ELISA Kit 2号染色体开放阅读框80抗体连环蛋白β1(CTNNβ1)检测试剂盒CTNNβ1 ELISA Kit 磷化CD32B抗体粒细胞趋化蛋白2(GCP2)检测试剂盒GCP2 ELISA Kit 过敏素C3(补体C3)抗体类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒TPS ELISA Kit 癌胚抗原相关粘附分子抗体类固醇5α还原酶1(SRD5α1)检测试剂盒SRD5α1 ELISA Kit 质多聚腺苷结合蛋白1抗体兰尼定受体1(RYR1)检测试剂盒RYR1 ELISA Kit 半胱氨蛋白酶抑制剂7抗体赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)检测试剂盒LOXL2 ELISA Kit 22号染色体开放阅读框29抗体赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)检测试剂盒LOXL1 ELISA Kit 磷酸化gamma氨丁酸B型受体1抗体MYOG/Myogenin/FITC 荧光素标记肌红蛋白抗体(肌**素)IgG 磷酸化谷氨酸受体2抗体RIP3/FITC 荧光素标记受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
使用及效果: 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 产品参数: 产品名称: 肠出血性大肠杆菌O104检测试剂盒(荧光PCR法) 规格: 50T 货号:BH-P63909 公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点 (1) 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性��大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 端粒酶相关蛋白1抗体
谷氨酰转酶3抗体
环指蛋白92抗体
环指蛋白调节蛋白激酶C蛋白抗体
TRIM50蛋白抗体
环指蛋白88抗体
锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体
环指蛋白98抗体
环指蛋白16抗体
环指蛋白105抗体
环指蛋白125抗体
凝血酶(凝血因子II)重链抗体
转移生长因子β受体3抗体(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ)
辣椒素受体抗体
肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体 肠出血性大肠杆菌O104检测试剂盒(荧光PCR法)胰羧肽酶B1抗体亮氨丰富重复LGI家族成员3(LGI3)检测试剂盒LGI3 ELISA Kit
维结合蛋白2抗体亮氨丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒LRG1 ELISA Kit
2号染色体开放阅读框80抗体连环蛋白β1(CTNNβ1)检测试剂盒CTNNβ1 ELISA Kit
磷化CD32B抗体粒细胞趋化蛋白2(GCP2)检测试剂盒GCP2 ELISA Kit
过敏素C3(补体C3)抗体类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒TPS ELISA Kit
癌胚抗原相关粘附分子抗体类固醇5α还原酶1(SRD5α1)检测试剂盒SRD5α1 ELISA Kit
质多聚腺苷结合蛋白1抗体兰尼定受体1(RYR1)检测试剂盒RYR1 ELISA Kit
半胱氨蛋白酶抑制剂7抗体赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)检测试剂盒LOXL2 ELISA Kit
22号染色体开放阅读框29抗体赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)检测试剂盒LOXL1 ELISA Kit
磷酸化gamma氨丁酸B型受体1抗体MYOG/Myogenin/FITC 荧光素标记肌红蛋白抗体(肌**素)IgG
磷酸化谷氨酸受体2抗体RIP3/FITC 荧光素标记受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3抗体IgG 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。