产品参数:
产品名称: 西部马脑炎病毒检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P63977
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加���被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
半裸法氏壳肝素结合蛋白/阳离子**蛋白37/天青杀素抗体Human HPCAL4 ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)试剂盒
香菇核突触蛋白抗体Human HPDL ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)试剂盒
美澳型核果褐腐病菌β-肌动蛋白/β-Actin 抗体(内参抗体)Human HPD ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒
枯草芽孢杆菌β淀粉样肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗体Human HPGD ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒
球孢白僵菌β淀粉样肽1-16/Aβ1-16抗体Human HPS1 ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP2/Gel A)抗体试剂盒
冷湖黄杆菌β淀粉样肽1-28/β-Amyloid 1-28抗体Human HPGDS ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒
金针菇激活素受体2A抗体Human HPS3 ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)试剂盒
蜡样芽孢杆菌水通道蛋白5抗体Human HPS4 ELISA Kit小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒
板栗蛇孢日规壳β淀粉样肽(1-40)抗体Human HPS5 ELISA Kit小鼠基质γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)试剂盒
高加索异常倚囊霉β淀粉样肽(1-42)抗体Human HOXC4 ELISA Kit小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)试剂盒
外来毛霉橙色变种载脂蛋白A1抗体Human HOXC8 ELISA Kit小鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)试剂盒
累四菲链霉菌β-抑制蛋白1抗体Human HOXD11 ELISA Kit小鼠肌酸激酶(CK)试剂盒
鞘氨杆菌属锚定蛋白B抗体Human HOXD12 ELISA Kit小鼠肌球蛋白重链(MHC)试剂盒
三叶草根瘤菌铜转运蛋白质α链抗体Human HOMEZ ELISA Kit小鼠肌球蛋白(MYS)试剂盒
谷氨酸棒杆菌苯单克隆/抗体Human HOOK3 ELISA Kit小鼠肌红蛋白(MYO/MB)试剂盒
黄灰链霉菌ASMTL蛋白抗体Human HOXD13 ELISA Kit小鼠肌酐(Cr)试剂盒
西部马脑炎病毒检测试剂盒(荧光PCR法)荧光素标记牛IgM丹叶大黄素-3'-O-葡萄糖苷Human, Mouse
荧光素标记鸡IgG丹芝B(标准品)Human, Mouse
荧光素标记鸡IgM单白前苷BHuman, Mouse, Rat
荧光素标记狗IgG胆固(标准品)Human, Mouse
荧光素标记狗IgM胆红素(标准品)Human, Mouse, Rat
荧光素FITC标记羊IgG(流式同型对照)胆木(标准品)Human, Mouse
荧光素标记羊IgM胆(标准品)Human, Mouse, Rat
荧光素标记豚鼠IgG淡豆豉(标准品)Human
荧光素标记豚鼠IgM蛋黄磷脂酰胆Human, Mouse, Rat
糖原蛋白1NR2A/NMDAR2A/FITC 荧光素标记谷氨酸受体2A抗体IgG
生长因子受体结合蛋白2相关接头蛋白抗体Phospho-NMDAR2A (Tyr1246) /FITC 荧光素标记磷酸化谷氨酸受体2A抗体IgG