产品参数:
产品名称: 新布尼亚病毒检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P63992
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
假单胞菌BSPRY蛋白抗体Human GPM6A ELISA Kit小鼠白介素1α(IL-1α)试剂盒
嗜中温寒冷杆菌BAIAP2L2蛋白抗体Human GPN1 ELISA Kit小鼠白介素18结合蛋白(IL-18BP)试剂盒
焦曲霉磷酸化相关死亡促进因子抗体Human GPR101 ELISA Kit小鼠白介素18(IL-18)试剂盒
绿色木霉磷酸化相关死亡促进因子抗体Human GOPC ELISA Kit小鼠白介素17(IL-17)试剂盒
枯草芽孢杆菌枯草亚种人β亚基人绒毛膜促性腺(β HCG)抗体Human GORAB ELISA Kit小鼠白介素16(IL-16)试剂盒
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum钙激活通道蛋白 α 1抗体Human GORASP2 ELISA Kit小鼠白介素15(IL-15)试剂盒
枯草芽孢杆菌枯草亚种钙激活通道蛋白 α 1抗体Human GOSR2(Golgi SNAP receptor complex member 2) ELISA Kit小鼠白介素13(IL-13)试剂盒
灰葡萄孢蛇巴曲酶抗体Human GNL1 ELISA Kit小鼠白介素12(IL-12/P70)试剂盒
枯草芽孢杆菌BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体Human GNL2 ELISA Kit小鼠白介素12(IL-12/P40)试剂盒
蕈状芽孢杆菌Bax抗体Human GMPR ELISA Kit小鼠白介素11(IL-11)试剂盒
白地霉Bcl-2抗体Human GNPAT ELISA Kit小鼠白介素10(IL-10)试剂盒
尖孢镰刀菌脑源神经营养因子抗体Human GMPS ELISA Kit小鼠白喉IgG抗体试剂盒
发酵乳杆菌碱性成纤维生长因子抗体Human GNA14 ELISA Kit小鼠白蛋白试剂盒
粉紫香蘑癌转移抑制基因1抗体Human GNAI1 ELISA Kit小鼠氧化酶(含黄素)A(MAOA)试剂盒
干草鞘氨单胞菌牛血清白蛋白抗体Human GNAQ ELISA Kit小鼠癌胚抗原(CEA)试剂盒
弗吉尼亚链霉菌β-酪蛋白抗体Human GNAO1(Guanine nucleotide-binding protein G(o) subunit alpha) ELISA Kit小鼠阿立新A(Orexin A)试剂盒
新布尼亚病毒检测试剂盒(荧光PCR法)鱼类白介素1β金丝桃素(标准品)Human, Mouse, Rat
小鼠CD19分子金松双黄(标准品)Human, Mouse
人糖化依赖的黏附分子金铁锁(标准品)Human, Mouse, Rat
大鼠成纤维生长因子10金银花(标准品)Human, Mouse
兔子纤溶酶原金樱根(标准品)Human, Mouse
白蛋白(夹心法一步法)金樱子(标准品)Human
抗-HAV IgM(夹心法 一步法) 金盏银盘(标准品)Human, Mouse, Rat
抗-HAV (总)竞争法一步法筋骨草甾CHuman, Mouse, Rat
抗抗体 IgG(间接法二步法) 锦灯笼(标准品)Human
G蛋白γ5/Gγ5 抗体OAT-1/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗大、小鼠)抗体IgG
G蛋白γ 1/Gγ 1 抗体OAT-3/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-3抗体IgG