产品参数:
产品名称: 水痘-带状疱疹病毒检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64021
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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绳状篮状菌分裂周期相关蛋白3抗体Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit兔游离睾酮(F-TESTO)试剂盒
Bacillus 卷曲螺旋结构域蛋白148抗体Human ELMOD2 ELISA Kit兔抑瘤素M(OSM)试剂盒
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黑孢霉卷曲螺旋结构域蛋白160抗体Human ELOF1 ELISA Kit兔乙酰胆碱酯酶(AChE)试剂盒
大肠埃希菌卷曲螺旋结构域蛋白22抗体Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)试剂盒
多主葡萄壳菌卷曲螺旋结构域蛋白25抗体Human ELP4 ELISA Kit兔乙酰胆碱(ACh)试剂盒
枯草芽孢杆菌卷曲螺旋结构域蛋白28A抗体Human EIF5B ELISA Kit兔胰淀素(Amylin)试剂盒
瓜亡革菌卷曲螺旋结构域蛋白28B抗体Human EMB ELISA Kit兔一氧化氮合成酶(NOS)试剂盒
平菇肿瘤/抗原74抗体Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit兔一氧化氮(NO)试剂盒
木糖葡糖酸醋杆菌卷曲螺旋结构域蛋白38抗体Human EMG1 ELISA Kit兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)试剂盒
酿酒酵母7号染色体开放阅读框72抗体Human EIF3M ELISA Kit兔血小板选择素,P -选择素试剂盒
美澳型核果褐腐病菌卷曲螺旋结构域蛋白42抗体Human EIF4A2 ELISA Kit兔血纤蛋白原(Fbg)试剂盒
鼠伤寒沙门氏菌卷曲螺旋结构域蛋白47抗体Human ELAC2 ELISA Kit兔血栓素B2(TXB2)试剂盒
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1号染色体开放阅读框151抗体Klotho蛋白(KL)检测试剂盒KL ELISA Kit
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复合前列腺特异性抗原单克隆抗体Ki-67蛋白(Ki67P)检测试剂盒Ki67P ELISA Kit
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2号染色体开放阅读框84抗体Jagged1蛋白(JAG1)检测试剂盒JAG1 ELISA Kit
磷化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体IL2诱导T细胞激酶(ITK)检测试剂盒ITK ELISA Kit
谷胱甘肽S转移酶A3抗体phospho-P53 (Ser6)/FITC 荧光素标记磷酸化肿瘤抑制因P53抗体IgG
磷酸化GADD153抗体phospho-P53 (Ser9)/FITC 荧光素标记磷酸化肿瘤抑制因P53抗体IgG