产品参数:
产品名称: 牛疱疹病毒1型检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64035
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
根瘤菌19号染色体开放阅读框42抗体Human ATG4B ELISA Kit人组织蛋白酶C(CTSC)试剂盒
胶冻样芽胞杆菌19号染色体开放阅读框44抗体Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人组织蛋白酶B(CTSB)试剂盒
酿酒酵母19号染色体开放阅读框48抗体Human BBS8 ELISA Kit人组蛋白乙酰化酶(HAT)试剂盒
大肠埃希氏菌19号染色体开放阅读框50抗体Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人组蛋白脱乙酰化酶2(HDAC2)试剂盒
长枝木霉19号染色体开放阅读框51抗体Human ATIC ELISA Kit人组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)试剂盒
硬水黄杆菌19号染色体开放阅读框52抗体Human ARP2 ELISA Kit人组蛋白去乙酰化酶(HDAC)试剂盒
Bacillus anthracis19号染色体开放阅读框55抗体Human ATR ELISA Kit人组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶SETD7(SETD7)试剂盒
巨兽芽孢杆菌19号染色体开放阅读框56抗体Human ATG4B ELISA Kit人组蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)试剂盒
四川散斑壳19号染色体开放阅读框57抗体Human BBS8 ELISA Kit人组蛋白H2b(histon-H2b)试剂盒
玉蕈离褶伞19号染色体开放阅读框61抗体Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人组(HIS)试剂盒
黑曲霉19号染色体开放阅读框77抗体Human ATIC ELISA Kit人足标记蛋白/足盂蛋白(PCX)试剂盒
产氨棒杆菌核DNA结合蛋白C1D抗体Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人总蛋白S(TPS)试剂盒
奥氏蜜环菌1号染色体开放阅读框58抗体Human ARP2 ELISA Kit人总蛋白C(TPC)试剂盒
枯草芽孢杆菌21号染色体开放阅读框66抗体Human AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) ELISA Kit人自然抗性相关巨噬蛋白2(NRAMP-2)试剂盒
嗜低盐适盐菌CDC42效应蛋白3抗体Human ATR ELISA Kit人自然抗性相关巨噬蛋白1(NRAMP-1)试剂盒
异常汉逊酵母异常变种7号染色体开放阅读框43抗体Human ARP3 ELISA Kit人转铁蛋白受体(TFR/CD71)试剂盒
牛疱疹病毒1型检测试剂盒(荧光PCR法)整合素alpha E2抗原盐罗通定(标准品)Human, Mouse
巨噬表面分子抗原盐洛美沙星(标准品)Human, Mouse, Rat
v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌因同源物A抗原盐马尼地平(标准品)Human, Mouse
黑色素瘤相关盐马普替林(标准品)Human, Mouse, Rat
丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗原盐吗啉胍(标准品)Human, Mouse
凋亡信号调节激酶1/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原盐美金刚(标准品)Human, Mouse
抑癌因抗原盐美利曲辛(标准品)Human
蛋白裂解酶(一种新的癌因)抗原盐美司坦(标准品)Human
人巨病UL49抗原盐美西律(标准品)Human, Mouse, Rat
特异性囊肿病液体蛋白15PAR-1/FITC 荧光素标记蛋白酶激活受体-1抗体IgG
特异性囊肿病液体蛋白15PAR-2/FITC 荧光素标记蛋白酶激活受体-2抗体IgG