产品参数:
产品名称: 口蹄疫病毒Asia 1血清型检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64039
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
泛菌属20号染色体开放阅读框106抗体Human AMPK gamma2 ELISA Kit人脂联素受体2(ADIPOR2)试剂盒
鹫峰假丝酵母20号染色体开放阅读框107抗体Human AKAP1 ELISA Kit人脂联素受体1(ADIPOR1)试剂盒
派伦霉属20号染色体开放阅读框117抗体Human ALY ELISA Kit人脂联素(ADP)试剂盒
天蓝色链霉菌20号染色体开放阅读框118抗体Human ACP1 ELISA Kit人脂肪酸转运蛋白5(FATP5)试剂盒
产朊假丝酵母20号染色体开放阅读框144抗体Human ADNP ELISA Kit人脂肪酸结合蛋白4(FABP-4)试剂盒
大肠埃希菌20号染色体开放阅读框151抗体Human ACP6 ELISA Kit人脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)试剂盒
平脐蠕孢菌20号染色体开放阅读框78抗体Human ADRA2B ELISA Kit人脂肪分化相关蛋白(ADRP)试剂盒
红色皱纹单胞菌20号染色体开放阅读框187抗体Human ACPT ELISA Kit人脂多糖结合蛋白(LBP)试剂盒
平脐蠕孢菌21号染色体开放阅读框59抗体Human ADRP/Perilipin 2 ELISA Kit人脂多糖/内素(LPS)试剂盒
大丽花轮枝孢(棉花黄萎病菌)20号染色体开放阅读框152抗体Human ACSL4/FACL4 ELISA Kit人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)试剂盒
20号染色体开放阅读框165抗体Human ACSL5 ELISA Kit人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)试剂盒
玫瑰紫青霉20号染色体开放阅读框166抗体Human ADSS ELISA Kit人整合素连接激酶1(ILK-1)试剂盒
Chitinophaga rupis20号染色体开放阅读框173抗体Human AKR1CL2 ELISA Kit人整合素β4结合蛋白(ITGB4BP)试剂盒
棕黑腐质霉20号染色体开放阅读框24抗体Human AKR1D1 ELISA Kit人整合素αM型(ITG αM/CD11b) 试剂盒
黑根霉20号染色体开放阅读框30抗体Human AKT3(Protein kinase Akt-3) ELISA Kit人整合素αⅤβ3(ITG αⅤβ3)试剂盒
聚生壳菌20号染色体开放阅读框4抗体Human AFAP1L1 ELISA Kit人整合素α4(ITGA4/CD49D)试剂盒
口蹄疫病毒Asia 1血清型检测试剂盒(荧光PCR法)整合素αVβ5抗体地蜈蚣(标准品) 4',5,7-Trihydroxy-3',6-dimethoxyflavone
干扰素调节因子1抗体地榆(地榆)(标准品) Tiliroside
白介素6地榆皂苷II(标准品) 4',5-Dihydroxy-7-methoxyflavone
γ干扰素诱导蛋白16抗体地榆皂苷I(标准品) Khasianine
整合素αVβ1抗体滇藏五味子素G Ligustroflavone
白介素-20抗体滇桂艾纳香(标准品) Schaftoside
干扰素相关发育调节因子2抗体滇鸡血藤(标准品) 9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob
白介素-1受体相关激酶2抗体滇(标准品) Tangeretin
磷化胰岛素受体β抗体化木兰花 Tangeretin
γ氨丁酸运载蛋白3抗体RACK1/FITC 荧光素标记受体激活蛋白激酶C1抗体IgG
GTP酶IMAP家族成员1抗体PAX3/FITC 荧光素标记配对盒因3抗体IgG