使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 禽白血病病毒检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64051
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
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PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合��引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
酿酒酵母钙平衡调节蛋白1抗体Human ITGA1/CD49a(Integrin alpha-1) ELISA Kit人血小板生长因子(PGF)试剂盒
传染性****病阿尔茨海默病淀粉样蛋白相关胶原蛋白抗体Human NKp44/NCR2(Natural cytotoxicity triggering receptor 2) ELISA Kit人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)试剂盒
莫拉卡他莫拉菌老年痴呆相关类钙粘蛋白CS1抗体Human NKp46/NCR1(Natural cytotoxicity triggering receptor 1) ELISA Kit人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)试剂盒
Pseudomonas 凋亡诱导蛋白NALP3抗体Human Cavin 1(Polymerase I and transcript release factor) ELISA Kit人血小板激活因子乙酰水解酶2,质(PAFAH2)试剂盒
黄硬皮马勃猪圆环病Ⅱ型衣壳蛋白抗体Human NKp30/NCR3(Natural cytotoxicity triggering receptor 3) ELISA Kit人血小板活化因子(PAF)试剂盒
锗栓孔菌血管加压素激活钙启动受体蛋白1抗体Human INT8(IntegRator complex subunit 8) ELISA Kit人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)试剂盒
围小丛壳干生长因子受体/表面分化抗原抗体Human CAMP(Cathelicidin Antimicrobial Peptide) ELISA Kit人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)试剂盒
东方拟无枝酸菌氯离子通道蛋白6抗体Human INT6(IntegRator complex subunit 6) ELISA Kit人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)试剂盒
粟酒裂殖酵母肽B/天蚕**肽B抗体Human RF-IgA(Rheumatoid Factor IgA) ELISA Kit人血纤蛋白原γ链(FGG)试剂盒
鞘氨单胞菌碳酸酐酶13抗体Human PAX-8(Paired box protein pax-8) ELISA Kit人血纤蛋白(Fibrin)试剂盒
蜂房哈夫尼菌氯离子通道蛋白5抗体Human RF-IgM(Rheumatoid Factor IgM) ELISA Kit人血吸虫抗原试剂盒
食酸菌属(噬酸菌属)轴突相关粘附分子抗体Human SSB(Lupus La protein) ELISA Kit人血吸虫抗体(IgM)试剂盒
苏云金芽孢杆菌卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD1抗体Human SSA(Sjogren syndrome antigen A) ELISA Kit人血吸虫抗体(IgG)试剂盒
细交链孢霉ATP依赖的解旋酶CHD3抗体Human KEAP1(kelch-like ECH-associated protein 1) ELISA Kit人血吸虫(SH)抗体试剂盒
产芽孢梭菌(生孢梭菌)碳酸酐酶7抗体Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) ELISA Kit人血栓素B2(TXB2)试剂盒
新疆糖单孢菌胶原蛋白和钙结合表皮生长因子结构域1抗体Human SP(Substance P) ELISA Kit人血栓素A2合成酶(TX-A2)试剂盒
禽白血病病毒检测试剂盒(荧光PCR法)脂肪结合蛋白3抗体间氨酚(标准品) Levofloxacin Hemihidrated
16号染色体开放阅读框48抗体间苯二酚(标准品) Levofloxacin Hemihidrated
色素P450 19抗体间酚(标准品) Lornoxicam
CD28抗体间羟苯(标准品) Lornoxicam
1号染色体开放阅读框195抗体交沙霉素(标准品) Losartan Potassium
NK抑制性受体2DL1抗体金O(标准品) Losartan Potassium
3号染色体开放阅读框67抗体金橙II(标准品) Masitinib
κ-酪蛋白抗体金刚烷(标准品) Mecillinam
唾液结合性**球蛋白样凝集素7抗体金诺芬(标准品) Medroxyprogesterone
3-磷酸甘油脱氢酶(兔来源**组化用抗体)Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857)/FITC 荧光素标记磷酸化血小板源性生长因子受体α/β抗体IgG
胶质源性神经营养因子抗体PDGF-R-B/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子受体-B抗体IgG
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。