使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: B族链球菌检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64076
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其���引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
新城疫病羧酸酯酶2抗体Human NTRK2(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit人上皮特异性抗原(ESA)试剂盒
藤黄檀根瘤菌羧酸酯酶3抗体Human PⅢCP(Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit人伤寒抗体(St-Ab)试剂盒
大肠埃希氏杆菌羧酸酯酶4A抗体Human PACAP-38(Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit人伤寒(ST)抗体(IgM)试剂盒
黑灵芝羧酸酯酶6抗体Human PADI4(Peptidyl Arginine Deiminase Type IV) ELISA Kit人伤寒(ST)抗体(IgG)试剂盒
酿酒酵母Cezanne蛋白抗体Human MUC6(Mucin 6) ELISA Kit人山梨脱氢酶(SDH)试剂盒
链霉菌内脏移位线管蛋白CFC1蛋白抗体Human MYCBP(C-Myc Binding Protein) ELISA Kit人沙眼衣原体抗原(CT)试剂盒
短密青霉补体因子H相关蛋白2抗体Human N-MID-OT(N-MID Osteocalcin) ELISA Kit人沙眼衣原体抗体(IgA)试剂盒
巨大芽胞杆菌补体因子H相关蛋白4抗体Human MUSKab(Muscle Skeletal Receptor Tyrosine Kinase antibody) ELISA Kit人沙眼衣原体抗体(CT)IgG 试剂盒
木层孔菌补体因子H相关蛋白5抗体Human NPYR1(Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA Kit人沙漠猬因子(DHH)试剂盒
泡囊短波单胞菌7号染色体开放阅读框28A抗体Human MYH10(Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit人性/通透性增加蛋白(BPI)试剂盒
*蜜环菌CpG结合蛋白抗体Human NPYR2(Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit人肽(cecropin)试剂盒
节杆菌CGG结合蛋白1抗体Human MYL1(Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal) ELISA Kit人色素上皮衍生因子(PEDF)试剂盒
长孢链霉菌cGMP依赖性蛋白激酶2抗体Human NAP(Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit人色氨酰tRNA合成酶(WARS)试剂盒
铜绿假单胞菌结蛋白样蛋白CGNL1抗体Human NAGase(N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase) ELISA Kit人色氨酸羟化酶(TPH)试剂盒
奥氏蜜环菌生长调节蛋白CGREF1抗体Human MUC13(Mucin 13) ELISA Kit人三角形四肽重复蛋白1(TTC1/TPR1)试剂盒
三叶草根瘤菌富含亮氨酸软骨蛋白抗体Human MHCC/HLA-C(Major Histocompatibility Complex Class I C) ELISA Kit人三官能酶亚基β,线粒体(HADHB)试剂盒
B族链球菌检测试剂盒(荧光PCR法)中分子量神经丝蛋白抗体五味子素(标准品) Lupeol
生长抑制蛋白NDN抗体五味子 Tectoridin
神经生长因子β抗体五味子烯(标准品) Tectorigenin
鼻咽癌相关因6抗体五味子乙素(标准品) Procyanidin B2
钠氢通道蛋白抗体五味子酯(标准品) Protopanaxdiol
钠离子转运蛋白抗体五味子酯戊 Protopanaxatriol
神经元特异性烯化酶/γ 烯化酶抗体五味子酯乙(标准品) Protodioscin
神经营养因子-3前蛋白抗体五脂素A1 Protosappanin B
核受体相关因子-1抗体五指柑(标准品) Polygalacic acid
葡萄糖-6-磷酸酶3/G6Pase-β抗体phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC 荧光素标记抗人、大、小鼠磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体IgG
α葡萄糖苷酶/溶酶体α-葡糖苷酶抗体phospho-ERK1(Thr197/Thr202) /FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体IgG
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。